血清丙氨酸氨基转移酶IFCC方法测定.docx

血清丙氨酸氨基转移酶 IFCC 推荐方法测定 实验原理 国际临床化学学会(IFCC) 推荐的紫外连续监测法。 ALT L-  丙氨 酸  +  -酮戊二酸  丙 酮酸  + L- LDH （乳酸脱氢酶） 谷氨酸 丙酮酸+NADH+H + L-乳酸 +NAD++H 2O 加入磷酸吡哆醛（ P-5-P ）是为了稳定 ALT 活性，避 免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏 低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)[1] 标本 ： 2.1 病人准备：12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或 EDTA血浆。 标本存放：3 天内的活性损失：2～8℃保存：10%； 15～25℃保存：17%；标本稳定性：-20 ℃保存至少可稳 定 4周。 标本运输：常温条件下保存运输。 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 实验材料 6.1 试剂 奥林巴斯 ALT测定试剂盒 试剂 1 + 试剂 2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于 2～8℃，若无污 染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度， 或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继 续使用。 6.1.4 注意事 项：试 剂中含叠 氮钠（ 0.95g/L ）为防 腐剂 。 不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措 施使用试剂。 6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分 析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文 件。 仪器：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生化 分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生化 分析仪操作规程.SOP 文件 检验结果的判断与分析 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以 2S为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参 见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。 计 算 方法 ：以 TruCal U 复合校 准品 ALT 校 准值校 准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠 的检测结果，以 U/L 报告。 12. 参考值范围 [4] 不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛 女性 31U/L 10 ～ 35U/L 男性 41U/L 10 ～ 50U/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参 考值。 临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（ GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（ AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。ALT 是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而 AST 水平 的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。 因此同时进行 ALT 和 AST 的检测，可用于鉴别肝损伤和 心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT 比率用于肝病的鉴别诊断。 比率1 预示中度的肝损伤；比率1 和严重肝病有关，常 见慢性肝病。 操作性能 14.1 线性范围 4～ 800U/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据 NCCLS推荐的标准方 法，AU2700 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用 于 分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS的规则。 不含磷酸吡哆醛 批内 x s CV 天间 x s CV 精密 度 (U/L) (U/L) (%) 精密 度 (U/L) (U/L) (%) n=20 n=20 样 品 1 22.8 0.70 3.08 样 品 1 22.2 1.38 6.22 样 品 2 42.6 0.68 1.60 样 品 2 44.8 1.17 2.62 样 品 3 99.3 0.92 0.92 样 品 3 101 1.02 1.00 含磷酸吡哆醛 批内 x 精密 度 (U/L)  s (U/L)  CV (%)  批间 精密 度  x (U/L)  s (U/L)  CV (%) n=20 n=20 样 品 1 33.3 0.99 2.96 样 品 1 33.8 1.25 3.71 样 品 2 72.1 1.36 1.88 样 品 2 72.0 2.04 2.83 样 品 3 133 1.76 1.32 样 品 3 128 2.77 2.16 14.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛 本 公 司 不 含 磷 酸 吡 哆醛 的 试 剂 盒 (y) 与 某 商 品 化 试 剂盒 (