产前染色体分析系统标准操作程序.docx

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染色体分析系统标准操作程序 一.目的:染色体分析系统是外周血、羊水细胞、绒毛组织的染色体进行阅读的基本条件。 二.使用范围:外周血、羊水细胞和绒毛组织的染色体的阅读。 三.原理:外周血、羊水细胞、绒毛组织的阅读条件要求极高。要求具有高清晰的分辨率。将干燥固定后的外周血染色体、羊水染色体、绒毛组织染色体在体外经吉姆萨等试剂染色后,制成的染色体标本,最后由染色体分析系统进行分类、分析和结果保存。 四、 标准操作程序 (一) 开始 1、不可移动相机方向 ,不可卸下物镜 ,不可更改聚光镜位置 , 如以下硬件方向及位置意外更改,系统必须重新校正! 2、 开启显微镜电源(白色电源) ,开启显微镜开关(显微镜左下方的开关) ,开启电脑, L左键单击桌面上Metafer4捷径 。 3、以下安全步骤必须在每次进行扫描前执行! 先转换到一个空的物镜位置, 把一个玻片架放到载物台上 , 插入样本玻片到第一个玻片位置, 在Metafer中, L左键单击第一个玻片位置 , 左键单击Stage–Move to Focus Plane命令, 手动转换到 20x物镜位置 (请不要使用自动物镜转换功能转换物镜以防止物镜与玻片发生碰撞), 在软件的实时窗口中进行对焦, 左键单击OK确认。 (二)MSearch–低倍寻找中期 1、 全自动方法设定扫描 左键单击Setup, 左键单击在Frame旁边的 ▲ / ▼ 按钮选择玻片架 , 左键单击No下的玻片位置编号(或X–代表激活在该玻片架上的所有位置) ,输入扫描设定: Name, Mode, Classifier , Search Window。自动低倍寻找中期+自动高倍采图: Mode选 MSearchTL ;Classifier选 LY-Auto; Sensitivity 选 6 或以上;Search Window 选 Whole Slide 。 左键单击 OK 按钮储存设定 , 左键单击Search按钮 ,在实时窗口中对焦样本 . 左键单击 OK 按钮确认对焦位置 。 2、半自动方法设定扫描 左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的 ▲ / ▼ 按钮选择玻片架 ,左键单击No下的玻片位置编号(或X–代表激活在该玻片架上的所有位置) ,输入扫描设定: Name, Mode, Classifier , Search Window。自动低倍寻找中期+自动高倍采图: Mode选 MSearchTL ;Classifier 选 LY ;Sensitivity 选 6 或以上 ;Search Window 选 Whole Slide 。 左键单击 OK 按钮储存设定 ; 左键单击Search按钮 ;在实时窗口中对焦样本 ; 左键单击 OK 按钮确认对焦位置。 (三)、 选择要执行高倍采集的细胞 左键双击玻片位置打开低倍扫描数据(如沒有转换样本的位置),或右键单击玻片位置打开低倍扫描数据(如已转换样本的位置) , 左键单击Gallery按钮 , 左键单击Mark Cell按钮 (绿色勾按钮) , 左键单击要执行高倍采集的细胞 , 左键单击Close 按钮关闭Gallery 。 设定扫描 : 左键单击Setup, 左键单击在Frame旁边的 ▲ / ▼ 按钮选择玻片架左键单击No下的玻片位置编号(或X– 代表激活在该玻片架上的所有位置) , 输入扫描设定: Mode, Classifier高倍采图: Mode 选 AutoCapt ;Classifier 选 CaptMetaTL。 左键单击 OK按钮储存设定 , 在玻片上手动加上镜油, L 击Search按钮 ,在实时窗口中对焦样本 , 左键单击 OK 按钮确认对焦位置。 (四)使用Ikaros手动补拍中期细胞 方法一 (需开启Metafer) 在Metafer中左键单击玻片位置打开低倍扫描数据(如沒有转换样本的位置),或 R-玻片位置打开低倍扫描数据(如已转换样本的位置) ,在Metafer中左键单击Ikaros按钮打开Ikaros,在 Ikaros中选择要补拍的中期图像 , 右键单击图像编号 , 左键单击重定位当前细胞命令 , 左键单击图像采集命令 , 按[F]激活对焦工具 ,在实时窗口中慢慢为中期细胞进行对焦,按[Enter]进行采图 。 方法二 (需开启MMC 及Ikaros 不需开启Metafer) 开启MMC , 开启 Ikaros,在 Ikaros打开要重拍或补拍的中期细胞 把显示在细胞下的Metafer Relative坐标分別输入到MMC 中的Target XY位置,然后 左键单击Move进行细胞重定位(Use Relative

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