氟致小鼠肝细胞线粒体分裂和融合紊乱分子机制.pdfVIP

摘要 摘 要 肝脏作为哺乳动物机体最大的消化器官，有解毒、消化、代谢、分泌和免疫 等功能，对机体的新陈代谢起重要作用。研究证实，长期摄入过量的氟可造成肝 脏严重损伤，诱发肝功能紊乱，严重威胁着人和动物的健康。为探讨氟损伤肝细 - 胞的分子机制，本研究通过向小鼠饮水中添加不同剂量的氟化钠 （以氟离子[F ] 计：0 mg/L 、25 mg/L 、50 mg/L 和 100 mg/L ）建立氟暴露动物模型，分别为对 照组、氟25 组、氟 50 组和氟 100 组。氟处理70 天之后，采集小鼠血液及肝脏 组织，利用HE 染色、透射电镜、qRT-PCR 和Western blot 等技术，从血清学、 组织病理形态学、分子生物学等角度，研究氟致小鼠肝细胞线粒体分裂和融合紊 乱分子机制。具体实验结果如下： 1. 氟对小鼠肝功能的影响 通过检测小鼠血清中肝功能指标发现，与对照组相比，氟 50 和氟 100 组各 - 项肝功能指标均显著上升 （P 0.01 ），特别是在添加100 mg/L F 组，损伤更加 明显，血清 T-bil 、ALT 、AST 、ALP 、和 γ-GT 分别升高了 24.54% （P 0.01 ）、47.93% （P 0.01 ）、51.06% （P 0.01 ）、38.66% （P 0.01 ）和 - 87.67% （P 0.01 ）。同时，发现添加25 mg/L F 时，血清中ALT 、AST 和ALP 分别升高了15.04% （P 0.05 ）、8.22% （P 0.05 ）和6.97% （P 0.05 ）。这 些结果表明过量摄入氟化物可以诱发小鼠肝功能异常。 2. 氟对小鼠肝组织形态结构的影响 HE 染色结果显示，加氟组小鼠肝细胞变形、排列紊乱，部分细胞核浓缩或 消失。特别是在氟 100 组中，氟对肝组织的损伤尤为严重。透射电镜下可见，氟 处理组小鼠肝细胞间隙模糊、细胞核浓缩、常染色质减少及核膜断裂；线粒体损 - 伤也尤为严重，表现为脊溶解断裂，甚至空泡化。添加 100 mg/L F 时，肝细胞 损伤最为严重，呈明显的剂量依赖性。这些结果表明，过量氟摄入不仅会严重破 坏肝组织和细胞的形态结构，而且会损伤肝细胞的超微结构。 3. 氟对小鼠肝细胞线粒体分裂的影响 透射电镜下线粒体形态计量学分析表明，氟25 和氟50 组线粒体数量与对照 组相比分别增加了18.18% （P 0.01）和39.39% （P 0.01）；氟 100 组与对照 组相比线粒体的长度和宽度分别缩短了 36.13% （P 0.01 ）和 28.15% （P 0.01 ）；此外还发现随着氟化物剂量的增加，线粒体的最大长宽比减小，空泡化 I 摘要 面积扩大。这表明氟暴露改变了肝细胞线粒体形态结构，出现明显的分裂迹象。 qRT-PCR 检测发现，随着氟剂量的增加，肝细胞 Drp1 、Mff 、Fis1 、 MiD49 、MiD51 和Dyn2 的mRNA 表达水平均显著上调（P 0.01 ），尤其在氟 100 组上调最为显著。同时，Western blot 结果显示，氟 25 组