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第十章 复制
名词解释:
半保留复制: DNA 复制是以 DNA 的两条链为模板,以
dNTP 为原料,在 DNA 聚合酶的作
用下按照碱基配对规律合成新的互补连,这样形成的两个子代
DNA 分子与原来的
DNA 分
子完全相同,故称之为复制。又因子代
DNA 分子的双链其中一条来自亲代,另一条是新合
成的,故名半保留复制。
冈崎片段: DNA 复制时,随从链复制中的不连续片段,命名为冈崎片段。
端粒: 是真核生物染色体线性 DNA
分子末端的结构。形态学上,
DNA 末端与它的结合蛋
白质紧密结合,像两顶帽子那样盖在染色体两端,使染色体
DNA 末端膨大成粒状。
框移突变: 指三联体密码的阅读方式改变,
造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变,
其后果是
翻译出的蛋白质可能完全不同。
切除修复: 细胞内最重要的修复机制,主要是
DNA 聚合酶Ⅰ及连接酶执行。
反转录: 以 RNA 为模板在反转录酶作用下合成
DNA 的过程叫做反转录。反转录在病毒致
癌过程中起着重要作用;在基因工程中,可用于
mRNA 为模板合成 cDNA 的实验中。
引发体: 是复制起始时形成的,原核生物
DnaB(解螺旋酶)、DnaC 、DnaG(引物酶)等蛋
白质结合到 DNA 复制起始区域形成的复合结构,称为引发体。
Klenow 片段: 是原核生物 DNA-polI
经特异的蛋白质酶水解后产生的大片段,
具有 3’→ 5’
核酸外切酶活性和聚合活性,实验室合成
DNA 及分子生物学研究上,常用
Klenow 片段代
替 DNA 聚合酶。
试述参与原核生物 DNA 复制过程所需的物质及其作用
①双链 DNA:解开成单链的两条链都作为模板指导 DNA的合成;
② dNTP:复制的原料;
③ DNA聚合酶:即依赖于 DNA的 DNA聚合酶,合成子链;原核生物中 DNA-pol Ⅲ是真正的复
制酶, DNA-pol Ⅰ的作用是切除引物、填补空隙和修复。
④引物:一小段 RNA,提供游离的 3’ -OH。
⑤其他的一些酶和蛋白因子:解链酶,解开 DNA双链; DNA拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ,松弛 DNA超
螺旋,理顺打结的 DNA链;引物酶,合成 RNA引物;单链 DNA结合蛋白( SSB),结合并稳定
解开的单链; DNA连接酶,连接随从链中两个相邻的 DNA片段。
原核生物复制起始的相关蛋白质有哪些?各有何功能?
蛋白质(基因)
通用名
功能
DnaA ( dnaA )
辨认起始点
DnaB( dnaB)
解螺旋酶
解开 DNA 双链
DnaC( dnaC)
运送和协同 DnaB
DnaG( dnaG)
引物酶
催化 RNA 引物生成
SSB
单链 DNA 结合蛋白
稳定已解开的单链
拓扑异构酶( gyrA , B)
理顺 DNA 链
端粒酶的分子组成有何特点?有什么功能?
端粒酶是一种由 RNA 和蛋白质组成的反转录酶, 它能在没有 DNA 模板的情况下,以
自身的 RNA 为模板,通过反转录作用,延伸端粒 3’-末端的寡聚脱氧核苷酸片段,催化合成端粒 DNA ,保证染色体复制的完整性。
4.简述反转录的基本过程,反转录现象的发现在生命科学研究中有何重大研究价值?
过程:( 1)以
RNA
为模板,在反转录酶催化下合成
RNA-DNA
杂化双链;
(2)由
RnaseH 水解
RNA-DNA
杂化双链中的
RNA
链。合成的
DNA
称 cDNA ;
(3)以新合成的
cDNA
链为模板,由反转录酶催化合成
cDNA
双链。
意义(
1)补充并完善了中心法则;
( 2)反转录病毒中有致癌病毒,人类免疫缺陷病毒(
HIV
)等;其研究关系到严重危害人
类健康的某些疾病发病机制、诊断、治疗。
(3)反转录病毒是分子生物学研究的重要工具,广泛应用于真核基因表达,基因转染等重
要研究方法上,是一种基因治疗的重要基因载体。
5. 复制和转录过程异同点( 2004 )
相
异
相同或相似
复制
转录
模板
2 股链均复制
模板链转录
DNA
原料
dNTP
NTP
核苷三磷酸
配对
A-T ;G-C
A-U ; T-A ;G-C
遵从碱基配对
聚合酶
DNA 聚合酶
RNA 聚合酶
依赖 DNA 的聚合酶
产物
半保留复制
mRNA ,tRNA ,rRNA
多核苷链
6.讨论复制保真性的机制
复制的保真性可由以下三种机制保证: ①子链 DNA链依照母链模板按碱基配对规律生成,保证子代 DNA与母链 DNA双链在碱基序列上的一致性, 从而保留了亲代的全部遗传信息。 这
是最基本的机制。②碱基选择功能: DNA-pol Ⅲ能依据碱基的化学构型表现不同的亲和力,
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