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本科课件-植物组织培养(完整).ppt

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植物快繁的特点 繁殖效率高。周年繁殖,生长速度快。 培养条件可控性强。 占用空间小。30m2 可培育数十万株苗木。 管理方便,利于自动化控制。 便于种质保存和交换。 8.1 植物快繁的器官形成方式 短枝发生型 丛生芽发生型 不定芽发生型 胚状体发生型 原球茎发生型 短枝发生型 概念:带叶茎段形成完整植株,再剪成带叶茎段继代成苗。 特点:一次成苗,性状稳定,过程简单,成活率高。 花卉和葡萄的试管苗生产常用此法。 丛生芽发生型 概念:顶芽或腋芽不断发生腋芽而呈丛生芽,再将单芽诱导生根成苗。 特点:性状稳定,增殖率高。 大多数植物快繁的主要方式。 axillary branching in a chimeral Dracaena 腋芽 不定芽发生型 概念:外植体脱分化形成愈伤组织,再分化产生不定芽,或不经愈伤组织直接形成不定芽,再将芽诱导生根成苗。 特点:增殖率高于丛生芽发生型,但较易变异,并会导致嵌合性状发生分离。 许多植物快繁的主要方式。 adventitious bud development in a chimeral Dracaena不定芽 胚状体发生型 概念:外植体经愈伤组织发育成胚状体或直接发育成胚状体,直接成苗。 特点:增殖率最高,但胚状体发生和发育较复杂。 目前此法应用尚不广泛。 原球茎发生型 概念:茎尖或腋芽培养产生原球茎,增殖形成原球茎丛,再切割增殖或培养成完整植株。 是兰花唯一有效的大规模无性繁殖方法,促使了兰花工业的形成。 1960年,Morel利用兰花茎尖培养,实现了脱毒和快速繁殖的两个目的。这一技术导致欧洲、美洲和东南亚许多国家“兰花工业”的兴起。 大花蕙兰原球茎 兰花原球茎切块再生形成茎的过程 石斛原球茎 石斛组培苗 石斛原球茎 8.2 植物快繁的程序 阶段Ⅰ:无菌培养的建立; 阶段Ⅱ:繁殖体的增殖; 阶段Ⅲ:芽苗的生根; 阶段Ⅳ:小植株的移栽驯化。 8.2.1 阶段Ⅰ:无菌培养的建立 母株和外植体的选取 无菌培养物的获得 外植体的启动生长 母株和外植体的选取 母株标准:性状稳定、生长健壮、无病虫害。 外植体: 木本、较大草本:带芽茎段、顶芽、腋芽等。 易繁殖、矮小或具短茎的草本:叶片、叶柄、花茎、花瓣等。 mother plants, drip-irrigated 滴灌母株 young shoots are cut off剪下幼嫩枝条 当植株的其他部位难以消毒时,可以选用种子,消毒后的种子在无菌条件下播种到含有水-琼脂培养基上或1/10 MS培养基上使其发芽。将经消毒的幼苗切成小片,作为外植体。 无菌培养物的获得 灭菌 接种 检测 充分的灭菌和“不受污染”的高存活率之间的折中。 leaves are discarded, petioles remain on the shoot去叶,保留叶柄 rinse with 80% ethanol, sterilize in 10 % commercial bleach (NaOCl) for 15 minutes Screening thousands of irradiated shoots... to obtain a few mutants A rose culture is initated in vitro Shoot tips are irradiated and multiplied for 5 subcultures Chlorophyll deficient mutant of rose obtained after gamma irradiation original cultivar red mutant white mutant 嵌合体和杂色植物 嵌合体植物是指顶端层一到两层细胞遗传上有差异的植物。 Draceana 顶端分生组织 高等植物芽顶点(分生组织)是多细胞和多层的 。 大多数双子叶植物:3层 2个被囊层(L1和L2) 1个基层(L3) 单子叶植物:2~3层 通常,有序的细胞分裂面防止了各层之间的混淆。 multilayered apex 顶端分生组织的每一层将形成植物的某一特定组织。 L1:叶表皮、茎表皮(包括刺)和花表皮 L2:栅栏组织、叶缘、配子、花瓣、茎 L3:海绵组织、叶脉、根和茎的中间部分 类型 扇形嵌合体:遗传上不同的细胞嵌入顶点的所有层次。 边缘嵌合体:一到两层顶点细胞的一部分有遗传差异。 外周嵌合体:一到两层顶点细胞整层有遗传差异。 核或叶绿体突变 顶点细胞遗传组成上的任何改变都可能引起嵌合体 色素突变 叶绿体突变 遗传单元

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