荧光光谱仪的简介与使用.pdfVIP

实验6 荧光光谱仪的简介与使用 荧光光谱仪，又称荧光分光光度计，是一种定性、定量分析的仪器。通过荧光光谱的测 试可以获得物质的激发光谱、发射光谱、荧光寿命以及液体样品浓度等方面的信息。荧光光 谱仪的组成在硬件上相似的，其差别主要在于硬件材质、仪器精密程度以及部分次要功能上 的不同。此外，不同荧光光谱仪所使用的软件在界面和功能上存在较大的差别。荧光光谱仪 的重要的部件包括光源、激发单色器、发射单色器、光电倍增光（Photomultiplier, PMT ）以 及外联设备电脑等。图1 为荧光光谱仪的主要组成示意图。 激发单色器激发单色器 氙灯氙灯 PMTPMT PMTPMT 电脑电脑 样品架样品架 发射单色器发射单色器 图1 荧光光谱仪的组成 某些物质在特定波长的光的激发下，可以发射出荧光。在荧光光谱仪中，利用氙灯的发 光作为激发光源，为样品的激发提供一定波段的复合光，其波长范围一般在200 − 900 nm 。 单色器用来从入射的复合光中分解出所需要的单色光。单色器本身包括入射/ 出射狭缝、准直 镜、色散元件和成像物镜等部件。色散元件是获得单色光的关键部件。仪器工作时，光源的 发射光在入射狭缝处聚焦成像，成像处刚好为准直镜的焦点，混合光经过准直器后被分散成 一束平行光，平行光经过色散元件变成一系列平行的单色光。平行单色光经过成像物镜分别 聚焦，通过转动色散元件的角度，可使不同波长的单色光分别从出射狭缝发射出来，然后照 射在待测样品上。在一台荧光光谱仪中需要两个单色器来分别获得激发用单色光和监测用（发 射）单色光。光电倍增管能够把入射的光信号转变成电信号，其主要作用是用来记录入射光 的强度。 对于一种未知发光性能的荧光粉来说，测试发射谱时，通常利用氙灯的最强254 nm 发射 来激发样品。这时激发单色器就从氙灯发射出来的复合光中分出254 nm 的紫外光。该紫外光 照射到荧光粉上，有可能激发荧光粉使其发射某种颜色的光（一般也是混合波长的光）。荧光 粉发射的混合波长的光被发射单色器以单色光的形式一一鉴别释放，同时利用PMT 记录相应 的强度。最后，这些单色光波长及对应的强度在电脑显示器中显示出来，所得图谱为发射谱。 测试激发谱时，一般选择荧光粉发射谱中的最强发射为监测波长（以610 nm 为例）。复合光 源通过激发单色器时，激发单色器把一定波长范围 (激发谱范围) 内的单色光一一分出来， 分别照射荧光粉，同时激发单色器把对应的光强度记录下来。此时，发射单色器把荧光粉的 发射谱中的单色光一一分出来，但只让610 nm 的光通过发射狭缝射出，PMT 记录其相应的 强度。值得注意的是，此时在电脑中显示出来的是（激发光源中分出来的）单色光的波长和 该单色光激发下610 nm 发射光的强度，所得图谱为激发谱。 对于一个未知的发光材料，光谱测试时一般可首先选择254 nm 或365 nm 激发下收集其 发射谱。测试时，通常发射波长要比激发波长大约20 nm ，如254 nm 激发下发射谱的收集一 般至少应该从274 nm 处开始。当用610 nm 监测收集激发谱时，激发谱的最大波长一般应该 小于590 nm 。此外，在光谱测试时，单色器光栅会引起倍频等问题，因而有时还涉及到一个 滤波片使用。例如，如果用254 nm 紫外光激发荧光粉时，会在508 nm 附近出现254 nm 的倍 频峰，在收集发射谱时应该避免该峰处于发射谱范围内，如果难以避免，可以使用滤光片来 处理。 例如，如图2 ，测试长余辉发光材料SrA lO :Eu2+,Dy3+发光性能时，通常用其最强的~380 2 4 nm 吸收作为激发波长，在~420 – 650 nm 范围内收集其发射谱；用最强发射~520 nm 作为监 测波长，在~280- 500 nm 范围内收集其激发谱（激发谱范围设置时避免了~260 nm 处倍频峰）。 图2 SrA lO :Eu2+,Dy3+ 的激发谱（a ）和发射谱（b