一个DOG1互作蛋白参与调控种子干燥耐受和休眠的机制研究.pdfVIP

一个DOG1互作蛋白参与调控种子干燥耐受和休眠的机制研究.pdf

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一个DOG1互作蛋白参与调控种子干燥耐受和休眠的机制研究 目录 摘要1 Abstractiv 缩略语表5 1 前言6 1.1研究问题的由来6 1.1.1萌发与休眠的定义6 1.1.2休眠的分类6 1.2影响种子休眠与萌发因素的研究现状7 1.2.1环境因素和后熟作用对休眠和萌发的影响7 1.2.2植物激素对种子休眠和萌发的影响8 1.2.3遗传因素对种子休眠与萌发的调控10 1.3 DOG1基因的研究现状 12 1.3.1 DOG1蛋白存在不同剪接形式 12 1.3.2 DOG1顺式非编码反义转录对拟南芥种子休眠的调控 12 1.3.3 DOG1调控种子休眠与激素途径的关系 13 1.4干燥耐受与种子休眠的关系研究现状14 1.4.1干燥耐受的定义14 1.4.2 干燥耐受与种子休眠的关系15 1.4.3 DOG1 同源基因对干燥耐受的影响 16 1.4.4 脱落酸对干燥耐受的影响16 1.5研究的目的与意义17 2 材料与方法18 2.1材料18 2.1.1植物材料18 2.1.2菌株18 2.1.3抗体18 2.1.4载体19 2.1.5常用培养基和营养液配方19 I 华中农业大学2020届硕士学位 (毕业)论文 2.1.6实验常用试剂20 2.1.7实验常用仪器设备22 2.2方法22 2.2.1 烟草叶片细胞瞬时转化实验22 2.2.2 Pulldown 实验方法23 2.2.3 原生质体的制备与转化的方法24 2.2.4 拟南芥RNA 的提取方法25 2.2.5 cDNA 合成和实时荧光定量PCR25 2.2.6 载体构建25 2.2.7 农杆菌介导的拟南芥的转化方法26 2.2.8 GUS染色及取材方法26 2.2.9 拟南芥萌发实验及统计方法22 2.2.10 外源施加激素处理拟南芥种子实验方法27 2.2.11 干燥耐受实验方法27 2.2.11 种子萌发数据统计方法27 3 结果与分析29 3.1 DIP 是DOG1 的互作蛋白29 3.1.1 DIP 与DOG1在细胞核中发生互作29 3.1.2 DIP 基因的表达模式分析31 3.2 DIP 对种子休眠与干燥耐受性的影响33 3.2.1 DIP 对种子休眠具有抑制作用33 3.2.2 DOG1和DIP 参与种子干燥耐受的建立过程37 3.3DIP 通过与DOG1互作调控其蛋白积累41 DOG1 DIP 3.4 大豆中 和 同源基因能够相互作用 41 4 总结与讨论44 4.1总结44 DOG1

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