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实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介 实验目的： 了解分子生物学实验室的常用仪器设备的类型及用途。 掌握常用仪器设备的正确操作方法。 实验原理： 分子生物学实验室常用仪器设备是顺利完成各项分子生物学实验的保障。若不会或错误地使用设备，不仅会使实验结果错误，还会给他人带来不便，有些还会带来经济损失。因此，正确使用操作仪器设备应是每位学生必须首先学会的技能。实验室主要仪器： 微量移液器、低温离心机、 PCR 仪、电泳仪、恒温气浴摇床、超净工作台、灭菌锅 实验内容及操作步骤： 微量移液器： 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。 移液器常见的四种规格分别是： 0.5～10μl( 读数窗显示 0.5～10.0,每转 1 档为 0.1μl); 10～100μl(读数窗显示 10.0～100, 每转 1 档为 1μl); 20～200μl(读数窗显示 20～200, 每转 1 档 1μl); 100～1000μl( 读数窗显示 100～1000, 每转 1 档为 5μl). 量液的操作步骤： 1． 将微量移液器装上吸头 （不同规格的移液器用不同的吸头） 2． 将微量移液器按钮轻轻压至第一停点； 3． 垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千 万不要将吸嘴直接插到液体底部； 4． 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入 吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少； 5． 等一秒钟后将吸嘴提离液面 6． 平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以 排出剩余液体； 7． 提起微量移液器，然后按吸嘴弹 2． 量液操作注意问题： 1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2． 一定要在允许量程范围内设定容量， 千万不要将读数的调节超出 其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3． 不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。台式高速离心机使用步骤 1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇 一下离心机，检查离心机是否放置平衡。 2、打开门盖，将离心管放入转子内， 离心管必须成偶数对称放入， 且要事先平衡，完毕用手轻轻旋转一下转子体，使离心管架运转 灵活。 3、关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关 紧。 4、插上电源插座，按下电源开关（电源开关在离心机背面，电源 座上方）。 5、设置转子号、转速、时间： 在停止状态下时，用户可以设置转子号、转速、时间，此时离心 机处于设置状态，停止灯亮、运行灯闪烁；按下启动离心开始 （常用，最高转速为 13000r/min，时间最长为 20 分钟）； 注意：对应的转子一定要设置在相应的转速范围内，不可超速 使用，否则对试管或转子有损坏。 6、离心机时间倒计时到 “0”时，离心机将自动停止，当转子停转 后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。 注意事项： 1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。 2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台面接触 和均匀受力，以免产生振动。 3、离心前，离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大 的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必须成偶 数对称放入。 4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机处理。 5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样 恒温气浴摇床 操作程序： 1）样品瓶牢固放入弹簧夹中 2）接通电源开关，仪器进入准备状态 3）参数设定，（设定温度、时间、转速等参数 ） 4） 按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转； 5）按下控制面板的电源键两秒，显示屏显示消失，关闭电源总 开关 超净工作台 操作程序： 1）使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒 剂擦拭消毒。 2）接通电源，提前 30 分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内 工作台表面积累的微生物， 15 分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。 3）工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气 流不受干扰。 4）操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开 关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。 5）最后开启工作台紫外灯，照射消毒 30 分钟后，关闭紫外灯，切断 电源。 注意事项： 操作时一定注意关掉紫外，防止对实验人员造成伤害灭菌锅 操作程序： 1）开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没至板 上 2）通电：将控制面板上电源开关按至 ON 处，若水位低（ LOW ） 红灯亮 3）堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过 200mm×100mm 100mm 为宜，各包装之间留有间隙