第三章分子克隆载体(Molecularcloningvectors).docxVIP

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  • 2021-01-13 发布于山东
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第三章分子克隆载体(Molecularcloningvectors).docx

第三章 分子克隆载体( Molecular cloning vectors ) [本章摘要 ] 将外源 DNA 或基因携带入宿主细胞( host cell )的工具称为载体,载体是基因操作的核 心工具。质粒载体是最常见的载体, 也是使用最方便的载体。 它应用了质粒的复制、拷贝数 及不相容性等性质。质粒载体有抗性基因、琥珀突变抑制基因等多种选择标记和 α -互补、 插入失活等筛选标记。常 见的质粒载体有: pBR322 、 pUC18/19 、 pUC118/119 、 pGEM-3Z/4Z 以及一些多功能的质粒载体,如: pBluescript ⅡKS (±)。 λ 噬菌体载体应 用了 λ 噬菌体的生物学性质。 λ 噬菌体有溶源状态和裂解循环两种状态, 有着复杂的分 子生物学调控机制。 λ 噬菌体载体有大小、 lacZ 基因、 cI 基因失活以及 Spi 筛选等选 择标记,分为插入型载体和置换型载体。常见的插入型载体有: λ gt10、 λgt11 及其衍生 载体和 λExcell 载体等。常见的置换型载体有: EMBL3/4 及其类似载体, λ gem-11 载 体。粘粒是带有 cos 序列的质粒。粘粒载体的工作使用了质粒和 λ 噬菌体的双重生物学 性质。常见的粘粒载体有: pJB8、 pcos1EMBL 以及卡隆 9 载体系列。构建粘粒文库时 会

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