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- 2021-01-13 发布于山东
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第三章
分子克隆载体( Molecular cloning vectors
)
[本章摘要 ]
将外源 DNA
或基因携带入宿主细胞(
host cell )的工具称为载体,载体是基因操作的核
心工具。质粒载体是最常见的载体,
也是使用最方便的载体。
它应用了质粒的复制、拷贝数
及不相容性等性质。质粒载体有抗性基因、琥珀突变抑制基因等多种选择标记和
α -互补、
插入失活等筛选标记。常 见的质粒载体有:
pBR322 、 pUC18/19 、
pUC118/119 、
pGEM-3Z/4Z 以及一些多功能的质粒载体,如:
pBluescript ⅡKS (±)。 λ
噬菌体载体应
用了 λ 噬菌体的生物学性质。
λ 噬菌体有溶源状态和裂解循环两种状态,
有着复杂的分
子生物学调控机制。
λ 噬菌体载体有大小、 lacZ
基因、 cI 基因失活以及
Spi 筛选等选
择标记,分为插入型载体和置换型载体。常见的插入型载体有:
λ gt10、 λgt11 及其衍生
载体和 λExcell
载体等。常见的置换型载体有:
EMBL3/4
及其类似载体,
λ gem-11 载
体。粘粒是带有
cos 序列的质粒。粘粒载体的工作使用了质粒和
λ 噬菌体的双重生物学
性质。常见的粘粒载体有:
pJB8、 pcos1EMBL
以及卡隆
9 载体系列。构建粘粒文库时
会
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