质谱-生物大分子及复合物质谱.pdfVIP

生物大分子及复合物质谱 1 题纲  概论  离子源  分析器  聚焦膜蛋白 蛋白质复合物 生物体中，蛋白质通常保持四级结构构或者是复合物，才能行使生物学 功能，如转录、翻译、蛋白质折叠等，都涉及到蛋白质的复合物 Joost Snijder and Albert J.R. Heck. Annu. Rev. Anal. Chem. 2014. 7:43–64 部分蛋白质复合物 核糖体，翻译合成蛋白质 伴侣蛋白，辅助蛋白质合成 CRISPR ，基因编辑复合体 Cowpea Mosaic Virus ，病毒核壳 发展历史 2012 Orbitrap(Nat.Meth. 2008 Heck) 2005 Membrane protein(Science, Robinson) IMMS for complex (Science, 2000 Robinson) Noncovalent MS ＞1MDa 1990s Virus ESI for solube protein and noncovalent protein complex(JACS,Gamen) 离子源 MALDI基质辅助激光解吸电离 蛋白质Pg1B的SDS和质谱图。SDS鉴定的蛋白质 量小于Pg1B的理论值84185Da，而质谱能够给出较为准确的质量 值。芥子酸SA作为MALDI基质。 Fan Chen, Renato Zenobi et al. Anal. Chem. 2013, 85, 3483−3488 蛋白质复合物纸喷雾 Vicki H. Wysocki et al. Anal. Chem. 2014, 86, 1342 − 1346 分析器 四极杆飞行时间质谱仪QTOF 要测定大质量的分子，通常要对质谱仪进行一定的改造，使得大质 量离子能够更好的传输和测定 Laganowsky, A. et al. Nat Protoc. 2013, 8(4) 639-51; Snijder, J. Heck, A. J. Annu Rev Anal Chem .2014,7,43-64 离子淌度--质谱联用 Kevin Giles et al. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004; 18: 2401–2414 轨道阱orbitrap 使用orbitrap用于大分子分析，同样要做部分改变：改变离子菱镜 （ion lens）的直流电压 （Direct current potential）；碰撞池 （HCD）中使用重气体，以提高气压，获得高效碰撞解离 Snijder, J. Heck, A. J. Annu Rev Anal Chem .2014,7,43-64 Orbitrap 高