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解螺旋 陪伴医生科研成长
活体成像实验
1. 实验原理
活体成像是指生物体处于活体状态下,在细胞和分子水平上应用多种成像方式对某种生
物行为进行定性或者定量分析研究的方法。与传统的体外成像或切片相比,其有许多优势:
1.可用同一实验对象进行多次处理得到一系列结果,从而排除个体间的差异;
2.能够在正常生理状态下检测活体内生物学活动,可真实模拟生理病理状态;
3.可动态观察处理结果,不需要处死实验对象。
2. 实验目的
活体动物体内光学成像主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)
两种技术。通过两种不同的标记方式,结合更高量子效率CCD 来监测被标记动物体内分子及
细胞等的发展进程。解螺旋/
3. 实验材料
3.1. 主要试剂(试剂来源仅供参考)
活体动物
3.2.主要仪器 (仅供参考)
仪器名称 来源 型号
法国VilberNEWTON 7.0 小动物
Vilber NEWTON 7.0
活体成像系统
4. 实验步骤
这里以活体成像技术监测肝转移肿瘤为例 (或见肿瘤转移模型)
肿瘤肝转移模型建立:
6
1. 制备表达荧光素酶基因(luciferase)的Lewis 肺癌细胞单细胞悬浮液。1×10 个细胞,
200 μl 体积。
1
解螺旋 陪伴医生科研成长
2. 麻醉6 - 8 周龄雌性裸鼠,体重16-22g。
3. 小鼠仰卧位左侧皮肤上做2-3 厘米长肋下切口。
4. 暴露脾脏,用4-0 缝合线结扎脾脏。在两条结扎线之间分切开,形成两个半个脾脏。
5. 将细胞用27G 针头注射器将100 μL 体积注射入一块脾脏,待细胞转移到肝脏,切除注射
的一半脾脏。一般肿瘤细胞排到肝脏约10 分钟。10 分钟后切除被注射的一半脾脏。另一半
脾放回回腹腔原位置。
6. 缝合皮肤,关闭腹腔。解螺旋/
7. 分别在0 天,6 天,10 天,14 天荧光素底物,进行活体成像3 分钟。监测肿瘤肝脏转移
生长情况。
活体成像视频:/x/page/q1341qywq1w.html
5. 应用示例文献1,2
1. Zhan Y, Ai F, Chen F, et al. Intrinsically Zirconium-89 Labeled Gd2 O2 S:Eu
Nanoprobes for In Vivo Positron Emission Tomography and Gamma-Ray-Induced
Radioluminescence Imaging. Small 2016; 12(21): 2872-6.
2. Wang Y, Chen J, Yang B, et al. In vivo MR and Fluorescence Dual-modality Imaging
of Atherosclerosis Characteristics in Mice Using Profilin-1 Targeted Magnetic
Nanoparticles. Theranostics 2016; 6 (2): 272-86.
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