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{企业通用培训}分子检验 检测技术讲义 8.RNA 有几种？各有什么功能和特性？ 二、核酸的理化性质 1 ．粘度2 ．紫外吸收3 ．沉降系数4 ．溶解性5 ．变性和复性 三、思考题 请简述生物体、细胞、染色体、蛋白质、核酸、基因等相互间的关系，并阐述分子检验检测 的目标对象。 三、分子诊断技术 概念 ：利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构及其表达水平是 否正常，从而对病害作出诊断的方法。 特点：针对性强、特异性高、灵敏度高、适用性强、诊断范围 四、分子诊断的常用技术方法 核酸分子杂交技术 1.限制性内切酶酶谱分析法 2.DNA 限制性片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism ，RFLP ）分 析 3.等位基因特异寡核苷酸探针（allelespecificoligonucleotide ，ASO ）杂交法 聚合酶链反应（PCR） 基因测序 基因芯片 动植物检疫的理想目标是：防止所有的检疫性有害生物（物质），人为跨境（国家或地区） 传播，并及时地发现、限制或铲除外来的检疫性有害生物。 动植物病原物检验检疫技术是动植物检疫工作的重要组成部分，在动植物、动植物产品及其 他检疫物的装载容器、包装物，以及来自动植物疫区的运输工具中是否有有害生物，或有害 生物的种类与数量有多少，只有通过检测才能知道。动植物检验检疫的目的就是要发现、检 查和鉴定有害生物，以作为出证放行或作进一步检疫处理的依据。 检测检验是判断一个样品内是否存在特定目标病原物，而病害诊断是病害发生原因和性质的 鉴定。 检测检验技术要求快速、准确、灵敏、安全、高通量、简便、易于标准化和推广应用。 有害生物的传统检测鉴定 ，主要是从症状、形态鉴定、接种鉴别寄主、病原物培养性状等方 面来观察有害生物所表现的表型和性状来判断，受环境因素，人为因素等多种因素的影响， 往往影响对结果的准确判断。 此外，对于病害，许多传统的诊断程序一般都涉及到两个过程：第一，先要对病原物质进行 培养，培养后再分析它的生理生化特性；第二，确定它到底是哪一类的病原物，是病毒、细 菌还是其他的物质。这种诊断方法成本高、速度慢、效率低。如果病原体生长特别慢或者根 本无法通过人工培养的方法获得，例如有些衣原体、植原体就不能培养或很难人工培养，那 么这种传统的诊断程序就很难有结果。 分子生物学研究表明，所有生命类型和不同物种差异的根源都是由遗传物质（DNA 或 RNA ） 决定的，而遗传信息又是核酸上的核苷酸序列所决定的。因此最准确的检测鉴定方法，就是 测定一些基于核酸序列的分子生物学检测技术。 分子检测技术主要是指应用分子生物学的方法来对有害生物进行诊断检测鉴定。从理论上讲， 任何一个决定特定生物学特性的 DNA 序列都应该是独特的，都可以用作专一性的检测标记， 这就是分子诊断检测鉴定的理论基础。 不论是传统的常规检测，还是现代的分子技术，一种有效的检测方法都应该具备以下 3 个条 件：①专一性（specificity）强 ，这指的是检测只对目标分子或只对某一种有害生物分子 产生阳性反应；②灵敏度（sensitivity）高 ，是指即使只有微量的目标分子，或是在有很 多干扰存在的情况下，也能够很灵敏地检测出所寻找的那种有害生物的分子；③操作简单 （simplicity），主要是指在做大规模检测时，要求能够操作方便、简单、高效、廉价。 分类、鉴定、命名、诊断 分类（classification）分类的任务是解决从个别到一般或从具体到抽象的问题，亦即 通过收集大量有关个体描述的资料，经过科学的归纳，整理成一个科学的分类系统。理想的 分类系统应该是反映生物进化规律的自然分类系统。 鉴定（identification）鉴定的任务与分类恰恰相反，它是从一般到特殊或从抽象到具 体的过程，亦即通过详细的观察和描述一个未知名称纯种生物的各种性状特征，然后查找现 成的分类系统，以达到知类辨名的目的。将病原物的种类和病害种类同已知种类比较异同， 确定其科学名称或分类上的地位。 命名（nomenclature ）命名的任务是为一个新发现的生物种确定一个新学名。亦即当你 详细观察和描述一个未知菌种后，经过认真查找现有的权威性分类手册，发现这是一个以往 还未记载过的新种，这时就得按微生物的国际命名法规给以一个新的学名。 诊断（diagnosis）从症状等表型特征来判断其病因，确定病害种类。 DNA