植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定.docx

实验四 植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定 一、 目的 从一份植物样品中系统分离和测定可溶性糖、 淀粉、氨基酸及蛋白质等多种成分，不仅 对研究植物体内碳、 氮代谢，了解植物的生长发育状况有重要意义， 亦可以作为鉴定其品质 的重要指标，而且也有助于训练基本操作技能。 二、 原理 （一） 分离提取原理 在80-85%的乙醇中，植物组织中的还原糖、蔗糖以及游离氨基酸和叶绿素等溶解，而 淀粉及蛋白质沉淀，再用 9.2 mol/L高氯酸溶解淀粉（蛋白质沉淀），最后用0.1 mol/L氢氧 化钠溶解蛋白质，然后选用适当的方法测定各个提取液中相应物质的含量。 （二） 测定原理 1?蒽酮比色法——可溶性糖含量测定 碳水化合物及其衍生物经浓硫酸处理， 生成糠醛，再与蒽酮脱水缩合而生成蓝绿色化合 物，在一定范围内其颜色深浅与碳水化合物含量成线性关系。 蒽酮反应的颜色深浅， 随温度 条件和加热时间而变化， 葡萄糖显色高峰在100C时，加热10 min后出现，而核糖在相同温 度下，加热3 min后出现。此法灵敏度高，糖含量达 30 %即可测定。 2?茚三酮比色法一一氨基酸含量测定 氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后，产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物，在 570 nm下有最大光吸收。在一定范围内，其颜色深浅与氨基酸的含量呈正比。 3?考马斯亮蓝G-250结合法一一蛋白质含量测定 考马斯亮蓝