苹果霉心病菌侵染特征与防治技术研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 苹果霉心病是普遍发生的苹果果实病害。霉心病可造成采收前落果、心室霉变腐 烂和贮藏期烂果等，严重影响苹果的产量与质量。明确病害侵染规律是制定有效防治 策略的基础。苹果霉心病的发生与果实结构关系密切，心室开放品种的苹果霉心病发 生更为严重。粉红聚端孢和链格孢是引起我国苹果霉心病主要病原菌。前期本实验室 明确了心室半开放品种富士的侵染特性，本研究拟借助粉红聚端孢荧光标记菌株开展 心室开放品种红星的侵染通路研究，同时构建链格孢荧光标记菌株进行花期侵染特性 观察；基于侵染特征，制定针对性防治方案并开展田间试验评价防治效果，以期为苹 果霉心病的防治提供依据。主要取得以下研究结果： 1. 利用带荧光标记的粉红聚端孢Trichothecium roseumTR45在花期接种红星花器 组织，解剖观察分析其侵染通路，结果显示：粉红聚端孢可以侵染苹果花瓣、雄蕊、 雌蕊等花器；落花后10-15d，大部分花器残体被萼片包拢到萼筒内；粉红聚端孢从离 生花柱间孔口侵入合生花柱，沿多细胞毛状体从花柱缝扩展至花柱基部；花后约30d， — 萼心间和心室壁组织逐渐开裂，形成一条贯通心室与花柱的通道 萼窦，萼窦随果实 膨大逐渐扩大；花后约60d，菌丝沿着开放的萼窦扩展进入心室腔，从心皮裂缝侵入 果肉组织引起腐烂。这些结果表明，在幼果期花柱缝为侵染的主要通道，该侵染特性 与富士品种一样，但红星品种萼窦开放明显早于富士，菌丝可以更早进入心室，这可 能是红星品种发病率更高的一个原因。 2. 链格孢Alternaria alternata 是苹果霉心病主要病原菌之一，为明确链格孢侵入 苹果心室的侵染特征，本论文开展了链格孢荧光菌株构建及花期侵染特性研究。鉴于 链格孢菌细胞壁较厚、色素沉积较大，可能影响标记菌株的荧光观察，本研究将GFP 基因与几丁质结合蛋白 （CBP）基因连接构建质粒。遗传转化获得了表现较强荧光的 链格孢CBP-GFP 标记菌株ZQ65，其分生孢子、菌丝、菌落形态、生长速度及致病性 与野生型菌株无显著差异。将ZQ65孢子悬浮液在花期接种苹果花器组织，48h 后花 药、花丝、花柱、花瓣等组织发生病变。这些结果显示，链格孢可以在苹果花器组织 上萌发并侵染引起发病，荧光菌株ZQ65可用于研究链格孢侵染苹果组织过程。 3. 对苹果心室螨类的习性进行了初步研究，发现心室伴生的螨虫可取食链格孢和 粉红聚端孢菌丝和孢子，并在PDA 培养基菌落上繁殖。初步鉴定螨虫为具有食真菌特 性的乱跗线螨Tarsonemuz confocus Ewing和腐食酪螨Tyrophagusputrescentiae Schrank。 田间实验显示，螨类可以携带粉红聚端孢孢子和菌丝体；统计显示，苹果霉心病的发 生和心室出现螨虫有显著相关性 （P0.05）。这些结果表明，心室螨虫可携带苹果霉 I 西北农林科技大学硕士学位论文 心病病菌，作为传播介体有可能在苹果霉心病的发生中发挥一定作用。 4. 2018 2019 和 年在陕西白水、甘肃天水、河南三门峡进行了苹果霉心病防治试 验。试验共设计了5个防治处理：花后和套袋前喷施2 次多抗霉素+杀螨剂以及套袋后 -成熟期3-5 次杀螨剂；花后-套袋前喷4 次多抗霉素；花后-套袋前喷3 次多抗霉素+杀 - 2 + 3 - 4 螨剂；花后套袋前喷 次多抗霉素 释放 次捕食螨；落花期套袋前喷 次生防菌剂。 结果显示：与对照相比 （花后与套袋前喷施2 次多抗霉素），这些处理的防效均低于 40%，对心室伴生的螨虫也没有明显防治效果。 关键词：粉红聚端孢；链格孢；苹果心腐病；食真菌螨 II 目 录