肥达试验及沉淀反应实验报告总结计划.docxVIP

.. 实验报告 实验名称 肥达试验 实验日期 院 系 专 业 班 级 姓 名 学 号 一、实验目的 学会肥达反 的原理、 方法以及 果分析。 理解肥达反 在 寒和副 寒杆菌感染 中的 用。 二、实验器材 ： 生理 水、患者血清、 寒杆菌 H 菌液、 寒杆菌 O 菌液、甲型副 寒杆菌 H 液、乙型副 寒杆菌 H 菌液 器材 ： 水浴 、冰箱、小 管 32 支、 管架、 号笔、移液 三、实验原理 1. 寒杆菌有三种抗原：分 菌体抗原（ O 抗原）、鞭毛抗原（ H 抗原）、体表抗原（ Vi 抗原）。其中以 O 抗原及 H 抗原的抗原性 ，而 Vi 抗原的抗原性不 ，且相 抗体效价 低且 短 ，随 菌的消除而消失，故不列 肥达 的 目。 （但其 有助于 寒 菌者。 ）当抗原遇到特异性抗体（抗 O 及抗 H） ，便会 生凝集反 ，通 凝集物量多少来推算病人体内抗体的多少，以 助 断、治 及判断 后。 2.用已知的 寒沙 菌菌体（ O）抗原和鞭毛（ H ）抗原，以及引起副 寒的甲型副 寒沙 菌、乙型副 寒沙 菌 H 抗原的 断菌液与受 血清做 管或微孔板凝集 ， 定受 血清中有无相 抗体及其效价的 。 四、实验过程及步骤 取清 小 管 32 支，分成 4 排，每排 8 支，依次 号。 2.32 支小 管，用移液 各注入 0.5ml 生理 水。 3.第一管内加入 1：10 稀 的患者血清 0.5ml ，用 1ml 吸管吹吸三次，混匀，吸出 0.5ml 注 入第二管作 倍稀 ，??依次稀 至第 7 管，弃去 0.5ml ，第 8 管 照。第二排、第三 排、第四排以相同步 加入患者血清。 4. 第一排各管内注入 寒杆菌 H 菌液 0.5ml ；第二排各管注入 寒杆菌 O 菌液 0.5ml；第三 排各加入甲型副作寒杆菌 H 液 0.5ml；第四排各管加入乙型副 寒杆菌 H 菌液 0.5ml。 ’. .. 置于 56℃水浴箱 2~4 小时。 6.放冰箱过夜或放 37℃水浴箱 18 小时后观察结果。 结果观察 最强 :上液澄清，细菌全部凝集沉淀于管底。 强：上液轻度混浊，细菌大部分凝集沉淀于管底。 弱：上液混浊，细菌少部分凝集。 不凝：液体呈乳状与对照管相同。 五、实验总结 1.结果与分析： 先观察对照管，正确结果应无凝集现象，再观察各试验管的凝集现象，凝集程度以“ +”多 少表示之。 （+++ ）最强，上液澄清，细菌全部凝集沉淀于管底。 （++ ）强，上液轻度混浊，细菌大部分凝集沉淀于管底。 （+）弱，上液混浊，细菌少部分凝集。 （-）不凝，液体呈乳状与对照管相同。 效价判定：以能出现“ ++”凝集现象的血清最高稀释度为该血清的凝集效价。 一般认为 O 抗体效价在 1： 80 以上， H 抗体效价在 1： 160 以上，有辅助诊断意义。 H 甲 或 H 乙达到 1： 80 或以上具有诊断意义。 但在分析结果时，应注意以下两点： 1）非肠热症患者，由于曾接种过伤寒，副伤寒疫苗或以往在流行区有过隐性感染或患过伤寒，副伤寒，以及回忆反应等原因，也可呈现阳性结果。不过，由这些原因所引起的阳性 反应主要是 H 抗体升高， O 抗体效价一般不高，同时，每隔 5~7 天试血一次，其抗体效价 一般不会随病程而升高。上述这些都有别于现症感染。 2）少数肠热症患者，由于发病初期曾使用大量抗生素，或机体有免疫缺陷病，或机体反应性极弱等原因，抗体效价可以很低，甚至为阴性结果。 因此不能只根据肥达氏试验的结果去作简单肯定或否定的结论， 必须结合当地流行情况， 既 往接触史，以及临床症状和体征，做出正确的判断。 2.肥达反应的诊断标准： 肥达反应是诊断伤寒副伤寒的辅助诊断， 其结果的解释必须结合临床变现和病程， 病史， 以 及地区流行病学情况。 机体患伤寒、 副伤寒，一般于发病后 1~2 周内血液中出现特异性抗体并且随着病程延长而效 价渐升，此时即可为阳性，第 4 周可达峰值，以后又逐渐降低。 一般以“ O”凝集效价在 1/80 或以上和 H ”在 1/160 或以上为阳性。 O 抗体主要是 IgM, 出现较早； H 抗体主要是 IgG,出现较晚。根据此特点，肥达试验结果有如下诊断价值： 二者均超过正常值，患伤寒的可能性大； ’. .. 二者均在正常值内，患伤寒的可能性小； H 抗体效价超过正常值， O 抗体效价正常，可能是接种了伤寒菌苗或者是接种的回忆反应； O 抗体效价超过正常值， H 抗体效价正常，可能是伤寒早期或者其他沙门氏菌感染； 一般间隔 1~2 周复查，若抗体效价比前次结果增高 2~4 倍，则具有诊断价值。 六、教师评价 实验报告 实验名称 沉淀反应 实验日期 院 系 专 业 班 级 姓 名 学 号 一、实验目