仪器分析技术 色谱法分类和特点 色谱法分类和特点.doc

色谱法分类和特点 一、色谱法分类 色谱法可从不同角度进行分类。 1.按两相所处状态分类 流动相为液体的色谱法称为液相色谱法(liquid chromatography，LC)；流动相为气体的色谱法称为气相色谱法（gas chromatography，GC）；流动相为超临界流体的色谱法称为超临界流体色谱(supercritical fluid chromatography，SFC)。 气相色谱仪 液相色谱仪 超临界色谱仪 如果按固定相的状态是固体或液体，液相色谱法又可分为液一固色谱法(LSC)和液一液色谱法(LLS)；气相色谱法又可分为气一固色谱法(GSC)和气一液色谱法(GLC)。 2．按色谱分离原理分类 按色谱分离所依据的物理或物理化学性质的不同，可分为： 1）吸附色谱法（adsorption chromatography） 吸附色谱法是以固定相为吸附剂，利用吸附剂对不同组分吸附性能的差别进行色谱分离和分析的方法。这种色谱法根据使用的流动相不同，又可分为气-固吸附色谱法和液-固吸附色谱法。 2）分配色谱法（distribution chromatography，DC） 分配色谱法是利用不同组分在流动相和固定相之间分配系数（或溶解度）的不同而进行分离和分析的方法。根据使用的流动相不同，又可分为液-液分配色谱法和气-液分配色谱法。 3）离子交换色谱法(ion exchange chromatography，IEC) 离子交换色谱法是用一种能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的色谱方法。这种色谱法广泛应用于无机离子、生物化学中各种核酸衍生物、氨基酸等的分离。 4）分子排阻色谱法(molecular exclusion chromatography，MEC) 又称凝胶色谱法是利用某些凝胶对不同大小的组分分子产生不同的滞留作用而达到分离目的的色谱方法。这种色谱法主要用于较大分子的分离，也称为筛析色谱法和尺寸（空间）排阻色谱法。 3．按操作形式分类 按固定相的操作形式可分为： 1）柱色谱法（column chromatography） 柱色谱法是将固定相装于柱管（如玻璃柱或不锈钢柱）内，色谱分离过程在柱管内完成的色谱法。柱色谱法可分为两大类。一类是将固定相装入色谱柱内，称为填充柱色谱法。另一类是将固定相涂在毛细管（毛细管中心是空的）内壁，称为开管型毛细管柱色谱法。如下图所示。 图1 柱色谱 图2 色谱柱 2）平面色谱法(plane chromatography) 平面色谱法是色谱过程在固定相构成的平面状层内进行的色谱法。包括：薄层色谱法(thin-layer chromatography，TLC)，它是将吸附剂（或载体）均匀地铺在一块玻璃板或塑料板上形成薄层，在此薄层上进行色谱分离的方法，如下图3所示。按分离机理可分为吸附法、分配法、离子交换法等。 纸色谱法（paper chromatography，PC），它是以纸为载体，以纸纤维吸附的水分（或吸附的其他物质）为固定相，样品点在纸条的一端，用流动相展开进行分离和分析的色谱法，如下图4所示。 薄膜色谱法（thin-film chromatography）。 图3 薄层色谱 图4 纸色谱 4.按分离效能不同分类 1）经典液相色谱法 将普通规格的固定相装于管径较大的柱管内构成色谱柱，常压输送流动相，以重力和毛细管作用为驱动力，一般不具备在线检测器。 现代液相色谱法 如：高效液相色谱法，与经典色谱法相比，分离周期较短，柱效较高。 二、色谱法的特点 1．分离效能高 混合组分在两相间不断进行吸附、解吸（或脱吸）或分配等作用，在此不间断的重复过程中，各组分间的微小差别被多次（可高达106次）放大，产生各组分移动速度的不同，造成各组分出色谱柱的先后顺序的不同而达到分离。有时一个分析周期内可以分离十多个化合物，甚至上百个化合物。特别对于有机同系物和异构体的分离，色谱法比经典分离技术（如萃取、蒸馏、重结晶等）更有效。 2．分离与分析功能兼备 色谱法与光谱法的主要区别在于色谱法具有分离与分析两种功能，而光谱法不具备分离功能。色谱法是先将混合物分离，而后可逐个检测分析，或采用联用技术在线检测，实现分离和分析一并完成。采用高灵敏度的检测器可以分析痕量组分（ng/g级），是分析混合物最有效的手段。 3．自动化程度高 色谱分析一般都可与先进的计算机技术结合，使仪器操作、分离分析自动完成，操作和数据处理简单、快速和准确。 4．应用范围广 色谱法可以分离分析无