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核基因 PCR 反应体系 30 μL，包括 20 ng 模板 DNA 、0.75 U PrimeSTAR?
HS DNA Polymerase(+100 μM MgCl2) (Takara), 0.20 μM 双向引物、
200 uM dNTP, 4% (v ) DMSO, 0.23 mg/ml BSA (BioLabs), 1 PCR buffer× ；
叶绿体 DNA 区段 PCR 反应总体系为 30 μL，包括 20 ng 模板
DNA, 0.75 U Premix TaqTM DNA Polymerase(+250 μM each dNTP, 100 μM MgCl
2) (Takara)、0.20 μM 双向引物
叶绿体 DNA 区段 PCR 反应总体系
初始浓度 加样量 终浓度 合适浓度
/30 μl
2
dH O 12.8ul
TM
Premix Taq DNA 15ul 0.75U ?
Polymerase(1.25U/25ul)
Primer 1(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM
Primer 2(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM
DNA 1ul 20ng
单位换算： 1M=1mol/L=1mmol/ml=1umol/ul=1nmol/nl, 10uM=10umol/L
核基因 PCR 反应体系
初始浓度 加样量 终浓度 合适浓度
/30ul
dH2O 17.2ul
5x PrimeSTAR 6ul 1×
2+
Buffer(Mg plus)
dNTP Mixture( 各 2.4ul 200 uM 20-200uM
2.5mM)
DMSO(100%) 1.2ul 4% 5-10%
BSA(10mg/ml) 0.7ul 0.23 mg/ml ?
Primer 1(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM
Primer 2(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM
?
PrimeSTAR 0.3ul 0.75U ?
HS DNA Polymerase(2
.5U/ul)
DNA 1ul 20ng
pcr 组分合适浓度范围的早期版本——刘老师
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