2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳.pdf

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2021-01-31 发布于广东
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聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) LOGO 聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide gel ） •丙稀酰胺 (acrylamide) + N,N,-亚甲基双丙稀酰胺 (N, N-methlenebisacrylamide, Bis) 丙稀酰胺交联的聚丙稀酰胺 N,N,-亚甲基双丙稀酰胺聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide gel ） • 聚合形成有三维网状结构的透明凝胶。 http://www.bio- /webroot/web/images/lse/products/equipment_supplie s/sku_view/global/ 161-1105EDU_view.j pg /userfiles/images/ib1.gif 网状结构 /slide/37 /images/ 15/POLYACRYLAMIDE+GEL+E LECTROPHORESIS.j pg 琼聚脂丙糖烯凝酰胶胺凝胶的孔隙大小由丙烯酰胺和bis的总浓度及其比例决定 •30% 丙烯酰胺/bis溶液（29:1 ）常用于核酸分离。 ht t p :/ / w w w . b i o - r a d . c o m/ z h - cn/sku/ 16 10 156-30-acry lamide- bis-solution-29-1?ID 1610156 /catalog/product/sigma/a3574?lang zhregion CN 琼不脂同糖浓凝度胶的聚丙烯酰胺凝胶的配置 30% 丙烯酰胺/bis溶液聚丙烯酰胺凝胶浓度 H O （ml ） 5xTBE （ml ） 10%过硫酸铵（ml ）（29 1 ）（ml ） 2 3.5% 11.6 67.7 20 0.7 5% 16.6 62.7 20 0.7 8% 26.6 52.7 20 0.7 12% 40.0 39.3 20 0.7 20% 66.6 12.7 20 0.7 琼聚脂丙糖烯凝酰胶胺凝胶的分离范围 •不同聚丙烯酰胺凝胶具有不同分辨范围：非变性聚丙烯酰胺凝胶浓度分离范围（bp ） 3.5%