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质粒DNA的提取
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质粒
通常存在于细菌中，偶见于链霉菌和酵母菌当中，是独立于染色体以外的共价闭合环
状DNA （有少数线性质粒和RNA质粒报道），具有自主复制的能力但依赖于宿主编码
的酶和蛋白质。
碱裂解法提取质粒DNA的原理
根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA的变性与复性的差异达到分离的目的
变性
强碱
DNA双链 DNA单链
中性
复性
操作步骤
HO
第一步：溶菌
HO
Solution I ： NH2
50 mM 葡萄糖溶液 HO
25 mM Tris-HCl (pH8.0) Tris
10 mM EDTA
4-5 mg/ml 溶菌酶 （可选）
RNase A （可选）
cf. 邢万金 《基因工程》
葡萄糖
增加溶液的粘度
维持渗透压
使大肠杆菌悬浮
缓存机械力（震荡）
EDTA
金属离子的螯合剂，可抑制DNA酶的活性。
O O
O-
O OH O
OH
O-
N
N 2+
N Mg
N O-
HO
O OH O- O
O O
cf. 邢万金 《基因工程》
溶菌酶
-1,4糖苷键
CH OH
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