什么是单抗-如何生产.pdfVIP

1、抗体和抗原的介绍 抗体：指机体的免疫系统在刺激下，由 B 淋巴细胞或增殖分化成的所产生的、可与相应 抗原发生结合的免疫球蛋白。 图：抗体的示意图 抗原：是指机体不能识别的异源物，如病毒、细菌等等。 当异源物（抗原）入侵机体的时候，抗原物最先会被巨噬细胞吞噬，我们的免疫系统就 会发生如下图的反应，最终B淋巴细胞在抗原刺激下活化成浆细胞之后，分泌的一类能与相 应抗原发生特异性结合，并消除抗原的免疫球蛋白（抗体）。主要分布在体液中，已知有 IgG 、IgA 、IgM 、IgD 和IgE 等5 类免疫球蛋白，主要分布在血液、体液、外分泌液及某些 细胞（如淋巴细胞）的细胞膜上。 图：抗体产生的机制 2、单抗 单克隆抗体定义：只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体，来自单个Ｂ淋巴细胞的克隆或一个 杂交瘤细胞的克隆。 单抗产生基本原理：由于每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因，只能被一种抗原决定 簇激活产生一种抗体，即为单克隆抗体，又称为单抗。但是B细胞生长缓慢得到的单抗数目 有限。后来科学家研究发现把能够产生单抗的Ｂ淋巴细胞与能够无限增殖的多发性骨髓瘤细 胞进行融合，形成杂交瘤细胞。这种细胞兼有两个亲代细胞的特征，既有骨髓瘤细胞无限生 长的能力，又有Ｂ淋巴细胞产生单克隆抗体的功能，为实现单抗的大规模奠定了基础。 3、单抗的制备 单抗的制备流程：制备抗原抗原注射小鼠取小鼠脾脏制成细胞悬液脾细胞 （即B细胞）体外和骨髓瘤细胞融合筛选阳性克隆（杂交瘤细胞）接种阳性克隆继 续细胞培养，具有两种方式：（1）体外大规模细胞培养获取单抗。（2）转移到小鼠体内培 养，从腹水中提取单抗单抗纯化制备。需要注意的是用常规技术生产的抗体是完全鼠源 抗体。 图：单抗的制备流程 4、单抗的分类 由于正常的手段制备的单抗是完全鼠源的抗体，进入人体，易被人的免疫系统当作异源 物，发生人抗鼠反应（即HAMA反应）。HAMA反应对鼠源的单抗分子有着较强的破坏作用，严 重影响了鼠源单抗在人体内的功效。因此20世纪80年代，研究者们开始使用基因工程手段改 造鼠源单抗，努力制造人源化的单抗，以及努力实现生产完全人化的抗体，减少人抗鼠反应， 按照单抗人源成分的组成可以简单非为四类：鼠源单抗、嵌合单抗、人源化单抗、全人源单 抗。 鼠源单抗：就是指鼠分泌的抗体，其所有序列都是鼠的，注射人体易产生人抗鼠反应（即HAMA 反应）。最初的上市的单抗药物大多是鼠源性的，鉴于副反应较大，目前已经很少使用。但 是由于鼠源单抗代谢快，适用于像利卡汀这样偶联放射性性物质的药物。 嵌合单抗：就是利用DNA重组技术把鼠单抗的轻链、重链可变区基因插入含有人抗体的恒定 区域的表达载体中，并转入合适的宿主表达出来的抗体。这样抗体即具有识别抗原的特异性， 又减少了抗体的人抗鼠反应。 人源化单抗：就是通过测定鼠源抗体的序列，截取其决定簇互补区的序列移植到人抗体的编 码框中表达，并经过一定的亲和力测试和筛选，最终选出仍然具有特异性识别能力的单抗。 可以最大限度的减少抗体的人抗鼠反应，而且特异性、亲和力不变，应用性较强，已经成为 主流技术。但是实现人源化具有一定的技术难度，是国内企业努力克服的技术难点。 全人源单抗：目前主要是通过转基因小鼠以及噬菌体展示文库制备的抗体，其重链和轻链都 是来源于人，因此副作用更小，免疫亲和力基本保持不变，是未来的主流技术。目前已经获 批生产的有7个，其中雅培的阿达木单抗（humira）是剑桥抗体技术中心的噬菌体展示技术 制备而来，EvaluatePharma曾预测到2016年，Humira的销售额将超越罗氏公司的抗癌药物 Avastin，成为世界上最赚钱的药物。 图：抗体产品不断升级、副作用更小效果更好 资料来源：长江证券研究所 现代技术的进步有望助推单抗的快速发展：从多抗单抗—基因工程抗体—完全人源抗 体，每一次技术的进步都为单抗的发展注入新的活力。未来单抗有望借助于基因工程技术的 发展，提高单抗的药效，扩大单抗的使用范围：（1）使抗体小分子化，如研究纳米抗体， 更容易达到实体瘤深部的肿瘤细胞，提高药物的疗效. （2）在抗体上偶联更为高效的放疗药 物、抗肿瘤抗生素等，使少量达到肿瘤细胞的抗体能够起到较强的治疗效果，可大幅减少抗 体的使用量，减少单抗药物成本，降低抗体药物的价格。（3）因为目前全球的单抗研发热 点主要集