影像学技术在基因治疗中的应用.docVIP

母像学抄林蔓因辭苟中的莎用 匕海交通大学医学院附属瑞金医院放射科(200025) 谢洁林综述汪登斌审校 摘墓基因治疗是一种融合了多学科、多种技术的全新的医学影像学技术,目前正处在广泛的研究中。 如何创伤小或无创地、快速有效地评估外猱性基因在体内的表达状况是决定基因治疗成功与否的-?个爾要 因素，而医学影像学技术具有创伤小或无创及采样全面等特点,因此在基因治疔方面正发挥着重蔓的作 用。就基因治疗的基本原理和方法以及各种彫像学技术在基因治疗领域中的应用予以综述。 关键词基因治疗：核医学：磁共振成像：体层摄彩术，X线计算机；超声检查；光学成像;分子影像学 早在1990年美国国立卫生研究院(NIH)的研 究人员就将腺TT脱氣酗(adenosine deaminase, ADA)基因导人到病人的淋巴细胞内，成功地改 善了山于ADA慕因缺失造成的免疫缺陷，从而开 辟了一个全新的医学研究和实践领域一基因 治疗。某因治疗是将外源性目的某因导人慕因缺 陷的个体靶细胞屮，从而改变靶细胞的基因表达, 在体内发挥治疗疾病的作用。主耍针对的是严垂 影响人类健康且日前治疗困难的疾病，大部分应 用于肿瘤的治疗，其他疾病包括艾滋病、单基因 缺陷疾病、囊性纤维化病、心血管病等。如何创 伤小或无创地、快速有效地评估外源性基因在体 内的表达状况是决定基因治疗収得成功的一个 重要因索，而医学影像学技术具有创伤小或无创 及采样全面等特点，因此在基因治疗方面发挥看 重要的作用。 -、基因治疗的基本原理和方法基因治疗的 主要方法包括缺失基因的补充、缺 陷基因的替 换、有害基因的抑制、口杀基因的引人等，涉及 的最根本的技术就是基因导入的成功实施及在 体表达。其基因导人的操作方式可分为两大类， B卩离体(ex vivo)导入基因和在体(in vivo)直接转 基因。前者为选择适当的靶细胞，在体外进行基 因转移，筛选出表达外源性基因的细胞，再将这 些转 基因细胞冋输到体内;后者是指将目的慕因 直接导入机体内的靶细胞。 载体是通常被用來传递棊因的介质。通过病 毒载体进行的棊因传递称为转导，而通过非病毒 载体进行的基因传递称为转染 病毒载体包括腺病毒、逆转录病毒、腺. 相关病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒等。病毒载 体的优点是外源基因的转导率髙，缺点是容易 造成局部 或全身的免疫应答反应，可导致癌基 因被激活和产生癌的可能性，以及难于批量生 产等。逆转录病毒(RV)是单链RNA病笹，它可 高效转导分裂状态的细胞,并整合入靶细胞染色 体，适用于离体和体内途径的基因治疗，但是 该病毒:基因组可以在靶细胞染色体上随机整 合，载体也可能与细胞染色体上整合的病毒片 段重组使其复制能力复活，即使有害的概率极 低，但后果却无法预知，这是此类载体的主要危 险性。腺病毒(ADV)是线状双链DNA病毒，具有 较广的敏感谱，可以同时感染分裂状态和非分裂 状态的细胞,它不被整合入细胞染色体，不会激 活宿主细胞的原癌基因或使其抑癌基因失活， 故将其用于基因治疗时对人类较安全，但亦山 丁-此特性，其表达是短暂的，而且某些病毒特 异性蛋白可同时表达，从而可导致机体的免疫 应答，不利于病毒载体的重复使用。腺相关病 毒(AAV)是线状单链DNA病毒，它需要在腺病 毒或痘苗病毒存在的情况下才能复制，它可整 合入非分裂状态的细胞染色体,获得较稳定的长 期表达，并月?不含任何病毒编码序列，体内应 用不会引起山病毒蛋白导致的宿主细胞毒T淋 巴细胞反应，但是，即使在敏感、宿主细胞中， 要获得高滴度的AAV也是很困难的。单纯疱疹 病毒(HSV)是线状双链DNA病毒，特异性亲和 中枢神经系统细胞和外周神经系统细胞，但不 145 145^148国外灰学临床放射学分册 Foreign Medical Sciences Clinical Radiological Fascicle 2007 May：30 (3)： 145^148 被整合入细胞 歩基金项LI :国家自然科学基金资助项l；l(TO7(M28,04JC14O47) 146 染色体内，而是以出联体或环状分子形式存在。 这类载体主要针对屮枢和外周神经系统疾病，但 保留了复制能力及毒性的病毒载体在肿瘤基因 治疗方面颇具前景人。 （二）非病毒载体包扌占脂质体、质粒、受体介 导的基因转染等。非病毒载体的优点是容易制 备，转基因表达时间长，无免疫源性，不和宿主 细胞基因组整合，很少产生突变;缺点是转染的 效率低，缺 乏细胞特异性。质粒是双链环状 DNA,对外源慕因的容纳量不限，但裸质粒DNA 会被带负电荷的细胞膜排斥，因此，转染效率较 低。为了避免被排斥，通常给裸质粒DNA包裹 上阳离子脂质体^使其能通过受体介导的细胞内 吞途径进入细胞屮。山于受体介导的基因转染方 法借助于细胞内吞这一生理