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- 2021-02-04 发布于广东
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第二节 甲基化酶
Methylase ;原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员,
用于保护宿主 DNA 不被相应的限制酶所切割。 ;一、DNA甲基化酶
甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别顺序。甲基化酶使识别顺序中的某个碱基发生甲基化,保护DNA不被限制性内切酶切开。;将限制性内切酶和甲基化酶同时作用,可使有几种可能识别顺序的限制性内切酶只对其中一种识别顺序有效。
;如果有一个DNA片段,有AvaⅠ的3个识别顺序,当用AvaⅠ处理后可得4个片段。可是,如果先用TaqⅠ甲基化酶和HpaⅡ甲基化酶使DNA顺序中的有些碱基甲基化,然后再用AvaⅠ去切,结果只有1个识别顺序可被AvaⅠ作用,只产生2个DNA片段。;二、甲基化酶的种类;Dam甲基化酶
DNA Adenine methylase; PvuII BamHI BclI BglII XhoII
MboI Sau3AI
识别位点中含GATC序列
ClaI(1/4) XbaI (1/16) TaqI (1/16)
MboII (1/16) HphI(1/16)
部分识别序列含GATC序列
4个ClaI位点(ATCGATN)中有一个该序列;有些限制酶对Dam甲基化敏感
不能切割相应的序列
如:BclI,
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