chap14核酸类药物ppt演示课件.pptVIP

第十四章 核酸类药物;（2）高RNA含量酵母菌株的筛选 可以从自然界筛选到RNA含量高的酵母菌株，也可以用诱变育种的方法提高酵母菌的RNA含量。 ;糖蜜;（3）用工业废水培养高含量RNA酵母 减少环境污染，降低粮食消耗 （4）RNA的提取实例 啤酒酵母是提取RNA的很好的资源。 取100g压榨啤酒酵母（含水70％ ），加入230ml含NaOH 3g的水，20℃以下搅拌30min。用6mol/L HCl调至pH7，搅拌15分钟，离心得上清液255ml。冷至10℃以下，6mol/L HCl调pH2.5，置冷过夜，离心等RNA1.8g（纯度80％）。;（二） DNA的提取与制备 1.工业用DNA的提?? 取新鲜冷冻鱼精20kg，用绞肉机粉碎2次成浆，加入等体积水，搅拌均匀，倾入反应锅内，缓慢搅拌，升温至100 ℃，保温15分钟，迅速冷却至20～25 ℃，离心去除鱼精蛋白等沉淀物，共获得35L含热变性DNA溶液。加乙醇沉淀，可得到固体DNA产品。 2.具有生物活性DNA的制备 动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟，匀浆于2500rpm离心30分钟，沉淀用同样体积的生理盐水洗涤3次，每次洗涤后离心，将沉淀悬浮于20倍量的冷生理盐水中，再捣碎3分钟，加入2倍量5％十二烷基磺酸钠，并搅拌2～3小时，在0 ℃2500rpm离心，在上层液中加入等体积的冷乙醇，离心即可得纤维状DNA