现代仪器分析技术 知识点1 高效液相色谱法 高效液相色谱法.docVIP

《仪器分析》教案 知识点 高效液相色谱法 学时 0.5学时 教学内容 高效液相色谱法、HPLC与GC之间的区别 教学重点 高效液相色谱法 教学难点 如何区别HPLC和GC 参考资料 仪器分析 第二版 主编：黄一石 化学工业出版社 实用仪器分析 第三版 主编：杨根元 北京大学出版社 饮用水水质准则 第四版 世界卫生组织著 上海交通大学出版社 一、高效液相色谱法 特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实验技术建立的一种液相色谱分析法。 高压：150-350*105 Pa 高效：大于30000塔板/米 高灵敏：10-9g （紫外检测）、10-11g （荧光检测）。 二、HPLC与GC差别 1．分析对象的区别 GC： 适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品； 但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型 及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可 检测。(占有机物的20%) HPLC： 适于溶解后能制成溶液的样品（包括有机介质溶 液），不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分 子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分 子和离子型样品均可检测用途广泛。（占有机物 的80%） 2．流动相的区别 GC： 流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用 力，只与固定相有相互作用。 HPLC： 流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力， 能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正 向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改 变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用， 当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流 动相也可以增大分离选择性。 3．操作条件差别 GC： 加温操作 HPLC： 室温；高压（液体粘度大，峰展宽小） 组成部件主要部件:高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。辅助装置:脱气机、梯度洗脱装置、自动进样装置、数据处理系统。