2015版药典表面微生物检测操作规程[宣贯].docxVIP

标 准 规 范20XX standardE标题：洁净区（室）外表微生物监测规范操作规程 编码： 颁布部分：质量部 起草： 日期：2015年 月 日 修订日期： 年 月 日 审阅： 日期：2015年 月 日 收效日期：2016年 月 日 同意： 日期：2015年 月 日 发放份数： 版次：第1版 分发部分：质量部、中心化验室 1.意图：树立外表微生物测验规范操作规程，保证测验人员操作规范化、规范化。 2.规模：适用于洁净室（区）外表、设备以及与产品触摸外表的微生物量的测验。 3.职责：外表微生物检测员。 4.内容： 4.1基本概念： 4.1.1菌落:细菌培育后,由一个或几个细菌繁衍而构成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表明。 4.1.2外表微生物： 4.1.3外表微生物菌落数: 规则面积的洁净室（区）外表、设备以及与产品触摸外表，用触摸平皿法或擦洗法检测的微生物的菌落数目，以个/皿表明。 4.2测验原理: 本测验办法运用触摸平皿法或擦洗法搜集洁净室（区）外表、设备以及与产品触摸外表的微生物，经若干时刻，在适合的办法和条件下让其繁衍到可见的菌落数，以平板培育皿中的菌落数来鉴定洁净室（区）外表、设备以及与产品触摸外表的微生物数，并以此来鉴定洁净区的洁净度。 4.3测验办法： 4.3.1运用的仪器设备和培育基: 高压消毒锅:运用时应严厉依照操作规程进行。 恒温培育箱:有必要定时对培育箱的温度计进行检定。 培育皿:一般选用φ90mm×15mm玻璃培育皿。运用前将培育皿置于160℃干热灭菌120min。 触摸碟：一般选用φ55mm无菌触摸碟。 培育基:胰酪大豆胨琼脂培育基。 将培育基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培育基注入培育皿，每皿约15ml。待琼脂培育基凝结后，将培育基平皿放入32℃恒温培育箱中培育72小时若培育基平皿上确无菌落成长即可供采样用，制备好的培育基平皿应在2-8℃的坏境中寄存。 4.3.2采样点挑选： 洁净区微生物测验点挑选外表微生物监测的采样点数目及其布局依据以下几个方面设置： 空调体系验证的成果 房间的用处 与产品的间隔 人流物流方向 怎么布点：关于同一洁净区，每个相同的取样物体在其不同的当地采2个样。如墙面2个采样点，地上2个采样点，洁净区首要设备2个采样点。 注：表面微生物监测的取样点数应依下列要素承认： 洁净区（室）的巨细； 设备、管路等的杂乱程度； 出产活动的重要性； 4.易受污染的部位等。 应考虑包含以下部位：每扇门、每个门把手、地板（至少两点）、墙面（不易被清洁/消毒的部位，至少两点）、共用介质的管路（不易被清洁/消毒部位）、出产设备的要害性部位（如灌装针、易与人员触摸的塑料帘膜、胶塞筒、传输带）等。依据洁净区内设备、设备等外表对产品和洁净室环境的影响程度，通常将外表分为三类：要害外表（与产品、容器及密封件直触摸摸或露出于产品、容器及密封件的外表）一般外表（如设备的外外表、墙面等）和地板，而且别离设定不同的微生物极限要求。 外表微生物的每点取样面积宜控制在25cm2左右。为防止搅扰，宜在出产活动完毕后取样。 4.3.3采样办法： 洁净区外表微生物测验办法。 4.3.3.1触摸平皿法： 取样：外表微生物监测用于外表菌监测，触摸平皿法广泛应用。取样时，翻开碟盖，无菌培育基外表与设备直触摸摸，均匀按压触摸碟底板，保证悉数琼脂外表 取样后，需求立即用75%酒精擦洗被取样外表，以除掉残留琼脂。 收好的养分琼脂触摸碟在32℃培育72小时。 4.3.3.2棉签擦洗法： 按规范要求进入相应洁净区指定方位，用灭菌镊子夹取浸有无菌生理盐水（放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟）的无菌棉签，管口处悄悄揉捏剩余的溶液，擦洗取样点外表25cm2的规模，来回涂擦5次，翻转取样棉签，再与前次擦洗移动方向笔直来回涂擦5次。 取样要求：取样进程严厉控制操作进程微生物的带入，尽可能选用固定力度、擦洗速度和擦洗线路。 取样后将取样棉签放入装有10ml采样液的试管中，随即盖上无菌塞，外用牛皮纸包裹，用绳扎紧。在运送和寄存进程中坚持试管竖直，直至做完菌检。 将取样后的采样管用力振摇3分钟以上，将管内溶液照微生物极限检查法（薄膜过滤法）进行检查，置于32°C恒温培育箱中，培育72小时，计数。 洁净区微生物测验频率和极限 日常监控一月一次 等级 触摸碟φ55mm cfu/碟 擦洗法（25cm2） A ＜1 ＜1 B 5 5 C 25 25 D 50 50 5.误差纠正 一旦发现外表微生物检测成果超超出纠偏规模，能够选用以下举动进行查询和评价： 检查取样和样品的处理是否正确，包含取样人员的资质是否承认； 回忆最近一次的悬浮粒子数的检测成果； 回忆最近一次的沉降菌的检测成果； 检查人员的更衣程序是否正确； 检查清洁设备和消毒剂的质量