3.1 细胞融合原理.pdf

第三章 细胞融合 第一节 细胞融合的原理 细胞融合是上世纪 60 年代发展起来的一门细胞工程技术，它不仅在基础研 究中有重要的作用，而且在植物、动物和微生物的改良，以及人类疾病的诊治、 基因治疗等领域中也展现着广阔的应用前景。通过细胞融合制备单克隆抗体被誉 为免疫学上的一次技术性革命。细胞融合已成为细胞工程中的核心技术。 一、细胞融合的原理 细胞融合的原理是，首先通过物理条件让两个亲本细胞并列，使细胞膜发生 接触； 然后在外力或外物的作用下使膜组织发生局部破坏，细胞膜融合形成细 胞桥； 细胞质相互渗透和交换，最终形成包围融合细胞的连续胞膜 （图 1）。 图 1 细胞膜融合的原理示意图 融合后细胞的表面特征会发生系列变化，膜成分和胞质成分，以及细胞内电 导率等均会因为成分的交流而发生改变 （图2）。 图2 细胞膜融合 这是细胞膜融合后细胞膜表面发生的变化情况，将带有红色荧光膜蛋白的人 细胞与带有绿色荧光膜蛋白的小鼠细胞进行融合，刚融合的杂交细胞一半是红色， 一半是绿色，培养 40 分钟后，杂交细胞膜上的红绿两种荧光就成均匀分布了 （图 3）。 图 3 荧光显示细胞膜融合过程中膜蛋白的变化 细胞膜融合后，还需经历两个阶段才能成为真正的杂种细胞。一是异核体阶 段，这个阶段细胞膜和细胞质已经发生了融合，但是融合细胞内还含有两个来自 异源亲本的细胞核，细胞核尚未融合。二是杂种细胞阶段，当异核体同步进入有 丝分裂后，核膜崩溃，来自两个异源细胞核的染色体结合在一起，形成一个新的 杂交的细胞核。融合细胞内只含有一个细胞核，此时的细胞就称为杂种细胞 （图 4）。 图4 杂种细胞的形成 一个完整的细胞融合过程包含 3 个步骤，即膜融合、胞质融合和核融合。因 此细胞融合的科学定义是：在外力(即诱导剂或促融剂)的作用下，两个或两个以 上的异源细胞或原生质体相互接触，从而发生膜融合、胞质融合和核融合，并形 成杂种细胞的现象称为细胞融合或细胞杂交 （图 5）。 图 5 细胞融合的过程 细胞融合技术是细胞工程诞生的重要标志，也是细胞工程的核心技术。 细 胞融合技术已广泛应用于细胞生物学、免疫学、遗传学、病毒学和医学等不同领 域的基础和应用研究。 细胞融合技术常用于单克隆抗体研制、疫苗制备，动植 物育种等领域，对于现代生物学、医学和农业研究具有深远的影响。