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槐米中天然抗氧化剂提取工艺及提取物抗氧化性能的研究 油脂的氧化酸败往往引起风味变化，采用抗氧化剂防止食品氧化是贮藏食品最常用也是非常有效的手段。现在食用油中较多使用的是TBHQ，BHA，BHT等合成抗氧化剂，但它们的安全性受到科学家的质疑，动物试验表明它们有一定的毒性和致癌作用。随着消费者对食品添加剂安全意识的提高，可替代的安全天然抗氧化剂成为研究热点。 槐米中的芦丁是黄酮类化合物的一种，所含酚羟基能阻断油脂自动氧化的自由基链反应，是一种良好的天然油脂抗氧化剂。将槐米中的抗氧化成分提取用作食用油的天然抗氧化剂，为开发合成抗氧化剂的替代品提供了一种可行的途径。 1 试验材料与仪器 1.1 试验材料 槐米，购自河南省郑州市天方药业有限公司；猪板油，市售（经120 ℃干法熬制）。 氧化钙（粉状）、异辛烷、碘化钾、十水合四硼酸钠（硼砂）、氢氧化钠、硫酸钾、氢氧化钾、可溶性淀粉、柠檬酸、盐酸、浓硫酸、乙酸、无水乙醇、重铬酸钾、硫酸铜、无水乙醚、L -抗坏血酸，以上试剂均为分析纯；BHA，BHT，TBHQ和茶多酚，均为食品级；甲醇为一级色谱纯；芦丁标准品，美国Sigma公司产品。 1.2 试验仪器 Waters 2695型高效液相色谱仪，美国Waters公司产品；743型Rancimat氧化酸败仪，瑞士Metrohm公司产品；722S型分光度计，上海精密科学仪器有限公司产品；Kjeltec 2300型自动定氮仪，福斯特卡托公司产品（瑞典）；*****E型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司产品；PHS-3型精密酸度计，上海虹益仪器仪表有限公司产品；HH-S型恒温水浴锅、SHZ-D（Ⅲ）型循环水真空泵、KQ-C型玻璃仪器烘干器，巩义市英峪予华仪器厂产品；RE-52A型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂产品；ZK-82B型真空干燥箱，上海市实验仪器总厂产品；ZXZ-2型旋片式真空泵，北京中兴伟业仪器有限公司产品；101FAB-1型电热鼓风干燥箱，上海树立仪器仪表有限公司产品；SXW-5-12A型箱式电阻炉，天津市中环实验电炉有限公司产品；、A型50Hz双层铁皮电炉，上海中航五金电器厂丹阳分厂产品；AY120型电子天平，Shimadzu Corperation公司产品；USL-2型比较色泽仪，上海易测仪器有限公司产品。 2 试验方法 2.1 槐米成分分析方法 槐米中水分的测定按照GB/T 5009.3—2003，槐米中灰分的测定按照GB/T 5009.4—2003，槐米中粗纤维的测定按照GB/T 5515—2008，槐米中粗脂肪的测定按照GB/T 5512—2008，槐米中粗蛋白的测定按照GB/T *****.2—2008。 2.2 槐米中有效成分芦丁含量的测定方法 （1）采用高效液相色谱法。色谱条件为C18型 色谱柱（5 μm，4.6 m×250 mm）；以甲醇-蒸馏水（60∶40）为流动相；检测波长260 nm；柱温30 ℃；流速1 mg/min。 （2）对照品溶液的制备。精密称取在120 ℃下减压干燥至恒质量的芦丁对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液。 （3）供试品溶液的制备。取芦丁粗粉0.1 g，精密称量，置具塞锥形瓶中；加入甲醇50 mL，称定质量；超声处理（功率120 W，频率25 kHz）30 min，放冷，再称质量；用甲醇补足减少的质量，过滤；精密量取续滤液2 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 （4）芦丁含量的测定。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.3 槐米提取物的制备 2.3.1 碱提酸沉法 槐米粉碎30 g，加入1 000 mL烧杯中，加入 5倍质量的水，用石灰水调pH值至8～9；加入3%的硼砂，不断搅拌，于55 ℃下恒温水浴30 min后抽滤；滤渣后再提取2次，提取条件同上；合并滤液，用稀盐酸调pH值至2～3，在60～70 ℃下保温10 min，静置6 h，析出沉淀，抽滤；滤渣在65 ℃条件下进行真空干燥，即得粗芦丁。 2.3.2 乙醇回流法 称槐米粗粉40 g，加入体积分数70%的乙醇 400 mL，用索氏提取仪在80～90 ℃下回流提取8 h；趁热过滤，重复提取1次，滤液浓缩，静置，滤出沉淀，用乙醚、丙酮洗涤；在65 ℃条件下进行真空干燥，即得粗芦丁。 2.3.3 超声波辅助法 将三角平底烧瓶置于超声波清洗槽的指定位置上，于瓶中加入槐花米粗粉30 g，水300 mL，硼砂0.9 g；用饱和石灰水调pH值为8左右，开动超声波发生器，于室温下提取30 min