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2017 江苏学业水平测试生物实验专题
考点 1 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
【实验原理】 (B)
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。
⑴还原糖 :单糖、麦芽糖和乳糖 ( 二糖除了蔗糖 )
50~65 ℃水浴加热
还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀
约 2min
⑵蛋白质
蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
⑶脂肪
脂肪 + 苏丹 III 染液→橘黄色
脂肪 + 苏丹 IV 染液→红色
【实验材料用具、实验方法步骤】 (A) 结果分析( C)
⑴还原糖的检测和观察
材料用具:( 1)实验材料:苹果或梨匀浆,马铃薯匀浆
2)配制:甲液: 0.1g/mL 的 NaOH溶液 + 乙液: 0.05g/mL CuSO4 溶液使用:混合(甲液 2mL,乙液 4-5 滴)后使用,且现配现用。
条件: 50-60 ℃水浴加热
实验步骤:
选材→制备组织样液→加入斐林试剂→水浴加热→显色(砖红色沉淀)
实验结果分析:
还原性糖:如果出现砖红色沉淀,则待测样品中含有还原糖,反之;则没有。
注意事项:
① 防止颜色的干扰:取材白色或近于白色,如: 苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。
不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料。
② 淀粉和蔗糖不是还原性糖。
③ 还原糖鉴定,必需水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。
④ 留出一些样液,以便与鉴定样液的颜色变化作对比。
1
⑵蛋白质的鉴定
材料:双缩脲试剂: ( A 液) 0.1g/mL NaOH溶液、( B 液) 0.01g/mL CuSO4溶液(分开使用)
实验步骤: 选材与制备: 黄豆浆滤液或蛋白稀释液 (使用蛋清做实验材料要稀释)
呈色反应:取 2mL组织样液,向试管中加入 1mLA 液,摇匀;再加入 B 液 4 滴,并摇匀。
组织样液变成紫色。
注意事项
① 双缩脲试剂 AB液分开使用,先加 1mL 0.1g/mL NaOH溶液,再加 4 滴 0.01g/mL CuSO4 溶液或者先加 A 液,后加 B 液。
② 用鸡蛋清作实验材料,鸡蛋清必须稀释,以免试验后黏住试管,不易洗刷。
③ 留出一些样液,以便与鉴定样液的颜色变化作对比。
⑶脂肪的检测和观察
实验步骤:方法一:花生种子匀浆 +3 滴苏丹 III 染液→橘黄色
方法二:(此法需要使用显微镜,因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴)
取材:做脂肪的鉴定实验,应选择 富含脂肪的种子 ,以花生种子为最佳,实验
前需浸泡 3-4h 。将子叶削成薄片
①选取最薄的切片
制片 ②在切片上滴 2-3 滴苏丹Ⅲ染液(染色 3min),染色时间不宜过长③去浮色( 1-2 滴体积分数 50%的酒精溶液,因为苏丹Ⅲ溶于酒精)
④制成临时装片(吸去酒精,加 1 滴蒸馏水,盖上盖玻片)
观察:使用显微镜。先用低倍镜观察,再用高倍镜观察
结论:视野中有被染成橘黄色的脂肪颗粒,说明有脂肪存在。
注意事项: 花生种子切片要薄,只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
【小结】① 斐林试剂与双缩脲试剂的比较
试剂
斐林试剂
双缩脲试剂
鉴定成分
还原糖
蛋白质
鉴定原理
还原糖中的醛基(
-CHO )在加热条件下能将
双缩脲( H2NOC-NH-CONH 2)在碱性溶液中
Cu(OH) 2 中的 Cu2+
还原成 Cu+ ,从而生成砖红色
能与 Cu2+ 结合生成紫色络合物,蛋白质分子
的 Cu 2O 沉淀
中含有与双缩脲结构相似的肽键
试剂浓度
甲液 :质量浓度为
0.1g/mL
的 NaOH 溶液;乙液:
A 液: 质量浓度为
0.1g/mL 的 NaOH 溶液; B
质量浓度为
0.05g/mL
的 CuSO4 溶液
液:质量浓度为
0.01g/mL 的 CuSO4 溶液
使用方法
甲液、乙液混合均匀后,再加入样液
先加 A 液造成碱性环境,再加
B 液
使用条件
加热(水浴 50~65 ℃)
不加热,摇匀即可
实验现象
浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
②溶液颜色的变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色
③脂肪的鉴定可以使用花生匀浆或花生切片来做,后者需要使用显微镜
④鉴定的材料一定要选择白色的
⑤斐林试剂只能证明是不是还原性糖,不能确定是哪一种还原性糖
2
考点 2 观察植物细胞的质壁分离和复原
【实验原理】: (B)
成熟的植物细胞的原生质层 (细胞膜、 液泡膜、两层膜之间细胞质) 相当于一层半透膜,细胞液(液泡内液体)具有一定的浓度,能够渗透失水和吸水。
原生质层比细胞壁的收缩性大, 细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时, 细胞不断失水时,
原生质层就会与细胞壁分离。 当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时, 细胞就会通过渗透作用而吸水,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
【实验材料用具、实验方法步骤】 :
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