生物负载测定（整理）.ppt

生物负载测定 .精品课件. * 微生物的定义和分类 原核类：细菌、放线菌、支原体、蓝细胞 立克次氏体、衣原体 微生物 真核类：真菌(酵母菌、霉菌）、原生动物、 显微藻类 非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒 * 定义： 一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 .精品课件. 细菌细胞形态显微镜检照片 放大1000倍杆菌 放大1000倍球菌 * .精品课件. 微生物细胞结构示意图 细菌细胞结构图 真菌细胞结构图 * .精品课件. 微生物的五大共性 1、体积小，面积大 巨大的营养吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的接受面 2、吸收多，转化快 高速生长的物质基础，活的化工厂。 3、生产旺，繁殖快 大肠埃希菌20min分裂1次，48小时后的重量则达到地球的4000倍。 注：因营养条件的限制，实际不可能发生。 4、适应强，易变异 极端环境的惊人适应能力 5、分布广，种类多 空气、水体、土壤、动植物都有分布，微生物有10多万种。 * .精品课件. 微生物的存在对医疗器械的影响 活的微生物对灭菌影响 非过度灭菌的工艺因医疗器械上生物负载增加，灭菌难度加大，可能导致灭菌失败。 活的微生物对使用者危害 灭菌不彻底的无菌医疗医疗器械，根据使用方式的不同，可能出现炎症、菌血症等病理反应。 微生物尸体对使用者的危害 典型例子：G-菌细胞壁脂多糖成分(内毒素)通过输液进入人体血液，致使人体发热。 * .精品课件. 基本概念 生物负载的定义 一件产品和/或无菌屏障上或其中存活的微生物总数。 ※对灭菌来说：生物负载应为无菌屏障内的所有微生物。因为，灭菌需要杀灭屏障内的所有微生物。 ※对使用来说：生物负载应为产品与人体的接触面，因为屏障通常不与人的自然腔道、血管、肌肉等接触。 ※对生产过程控制来说：生物负载应是屏障内所有的微生物，反映过程的控制水平。 * .精品课件. 基本概念 校正因子correction factor 用于补偿无法从产品和/或微生物培养中完全采集的数值。 培养条件 culture conditions 促进微生物复苏、生长和/或繁殖所采用的培养基和培养方式。 回收率 recovery efficiency 用一特定技术从产品上采集和/或培养微生物能力的测定值。 样品份额（SIP） sample item portion 从某一产品单元上取出的用于试验的部分。 * .精品课件. 产品选择的基本原则 选择和处理用于生物负载测定的产品的程序，应能确保所选产品对包括包装材料和过程的常规生产具有代表性。 若为生物负载测定的目的对产品进行分类，应记录每一分类内包含这一产品的理由。理由应包含所选产品在是整个分类里具有代表性的标准。 由于生物负载测定易受时间推 移的影响而改变，应考虑生物 负载测定的取样时限。 * 部分液体产品可能存在支持微生物生长的现象 .精品课件. SIP取样的基本要求 如果已验证生物负载在本产品上或内是均匀分布的，则SIP可以是该产品的任何部分。 否则，样品应包含能代表所制产品的每种相应材质而随机选取的产品部位。 若已知生物负载分布，可以从认为对灭菌工艺最有严峻挑战的产品部分选择SIP。 * SIP选择 产品 表面积 植入物（不可吸收） 质量 粉末 手术服 植入物（可吸收） 长度 管路（直径一致） 体积 流体 .精品课件. 生物负载的测定 * .精品课件. 生物负载的微生物鉴定 鉴定的意义 通过微生物的鉴定，了解微生物的基本来源，为日常微生物的控制提供依据；灭菌工艺的的适合性提供依据（是否存在耐受特定灭菌因子的芽孢菌的存在）。 通常鉴定的方法 ※常规鉴定：染色特性；细胞形态；菌落；选择性培养的使 用；生化特性； ※分子水平鉴定：DNA测序后与数据库提供遗传序列比对。 * .精品课件. 生物负载测定方法的确认 若测定方法中包括采集产品上微生物，则对该技术适当性的评价； ※确定回收率,以便得到修正系数； ※液体类的产品非常便捷,通常不需要回收率. 对包括培养条件和微生物计数技术在内的微生物计数适当性的评价； ※不是所有的微生物可以通过单一培养基能有效培养出来的。 微生物鉴定技术适合性的评价。 * .精品课件. 常规测定和数据判读 确定样品大小和取样频率。 测定方法要规定,并形成作业指导书 根据生物负载的使用目的确定鉴定的程度,通常鉴定是否存在芽孢 生物负载数据用于确定灭菌工艺的处