论述生物化学6核酸2.ppt

The crystal structure of a 23S ribosme .精品课件. * 四 、其他小分子RNA及RNA组学 除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。 snmRNAs .精品课件. * snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运。 .精品课件. * RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。 RNA组学 .精品课件. * 核酸和蛋白质的比较 .精品课件. * 核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第 四 节 目 录 .精品课件. * 一、核酸分子具有强烈的紫外吸收效应 .精品课件. * 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 OD260的应用 目 录 .精品课件. * 二、核酸的变性(denaturation) 定义：在某些理化因素作用下，核酸双螺旋区域的氢键断裂，变成单链的过程。 方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如甲醛等。 变性后其它理化性质变化： OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 目 录 .精品课件. * DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 .精品课件. * 例：变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 .精品课件. * 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（absorbance，A，A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线(melting curve) 。 目 录 .精品课件. * Tm：解链过程中，紫外光吸收值变化ΔA260达到最大变化值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。Tm与G+C含量成正相关。 目 录 .精品课件. * 三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 目 录 .精品课件. * 影响复性的因素 ① 样品的性质 ② DNA片段的大小 ③ DNA的浓度 ④ 温度 ⑤ 离子强度 .精品课件. * 在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在复性时就可以形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) .精品课件. * DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 .精品课件. * .精品课件. * .精品课件. * .精品课件. 核苷酸 磷酸 核苷 — 核糖或脱氧核糖 碱基 嘧啶: 胞嘧啶(C),尿嘧啶(U) 胸腺嘧啶(T) 嘌呤: 腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G) 戊糖 核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子 核酸分为DNA和RNA .精品课件. * （二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） 3.54 nm .精品课件. * 碱基互补配对 .精品课件. * DNA 核小体 螺线管 超螺线管 染色单体 压缩7倍 压缩6倍 压缩40倍 压缩5倍 共计压缩8400倍 .精品课件. * 第三节 RNA的结构与功能 Structure and Function of RNA .精品课件. * 大多数天然RNA是一条单链，通过自身回折形成部分螺旋区，部分非螺旋区。