全套课件 生物工程设备--郑裕同.ppt

三、 肽酶 (pepzyme)  肽酶就是模拟天然酶活性部位而人工合成的具有催化活性的多肽，这是多肽合成的一大热点。 Johnsson等人为克服苯丙氨酸工业合成的关键步骤草酰乙酸脱羧反应中所用酶需金属辅酶的不便，想探寻与此不同反应机理的不需金属辅酶的脱羧酶。 可借鉴的认识只有：胺可以催化草酰乙酸脱羧，其历程是先形成烯胺，进而脱去CO2。 然而尚未发现采用烯胺历程的天然脱羧酶，全新合理设计就成了唯一可行的方法。 基于胺催化脱羧的六大特征和α-螺旋在催化活性中的重要性的认识，以烯胺机理设计出两个多肽。结果发现，其催化效率比丁胺高3~4个数量级，但比天然酶活性低得多。 Atassi和Manshouri利用化学和晶体图象数据所提供的主要活性部位残基的序列位置和分隔距离，采用“表面刺激”合成法将构成酶活性部位位置相邻的残基以适当的空间位置和取向通过肽键相连，而分隔距离则用无侧链取代的甘氨酸或半胱氨酸调节，这样就能模拟酶活性部位残基的空间位置和构象。 设计合成的两个29肽ChPepz和TrPepz分别模拟了α-胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶的活性部位，二者水解蛋白的活性分别与其模拟的酶相同；在水解2个或2个以上串联的赖氨酸和精氨酸残基的化学键时，TrPepz比胰蛋白酶的活性更强。