病原微生物检测操作作业规程.docVIP

病原微生物检测操作规程 一、打开标本及处理 接收和打开标本人员应该了解标本对身体健康潜在危害，并接收过怎样采取标准防护方法培训，尤其是处理破碎或泄漏容器时更应如此。标本内层容器要在生物安全柜内打开，并准备好消毒剂。 标本打开处理时： 应该在生物安全柜内打开标本管。 必需戴手套，并提议对眼睛和黏膜进行保护（护目镜或面罩）。 打开标本管时，应用纸或纱布抓住塞子以预防喷溅。 二、避免感染性物质注入 经过认真练习和仔细操作，能够避免破损玻璃器皿刺伤所引发接种感染。应尽可能用塑料制品替换玻璃制品。 锐器损伤（如经过皮下注射针头、巴斯德玻璃吸管和破碎玻璃）可能引发意外注入感染性物质。 以下两点能够降低针刺损伤：（a）降低注射器和针头使用（可用部分简单工具来打开瓶塞，然后使用吸管取样而不用注射器和针头）；（b）在必需使用注射器和针头时，采取锐器安全装置。 不要重新给用过注射器针头戴护套。一次性物品应丢弃在防/耐穿透带盖容器中。 三、血清分离 只有经过严格培训人员才能进行这项工作。 操作时应戴手套和眼睛和黏膜保护装置。 规范试验操作技术能够避免或尽可能降低喷溅和气溶胶产生。血液和血清应该小心吸收，而不能倾倒。严禁用口吸液。 移液管使用后应完全浸入消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡合适时间，然后再丢弃或灭菌清洗后反复使用。 带有血凝块废弃标本管，在加盖后应放在合适防漏容器内高压灭菌和/或焚烧。 应备有合适消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。 四、对血液和其它体液、组织及排泄物标准防护方法 设计标准防护方法（其中包含“常规预防方法”）以降低从已知或未知感染源微生物传输危险。 五、玻璃器皿和“锐器” 尽可能用塑料制品替换玻璃制品。只能用试验室等级（硼硅酸盐）玻璃，任何破碎或有裂痕玻璃制品均应丢弃。 不能将皮下注射针作为移液管使用。 六、用于显微镜观察盖玻片和涂片 用于显微镜观察血液、唾液和粪便标本在固定和染色时，无须杀死涂片上全部微生物和病毒。应该用镊子拿取这些东西，妥善储存，并经清除污染和/或高压灭菌后再丢弃。 七、一次性接种环 一次性接种环优点是无需灭菌，所以能够在生物安全柜中使用。不然，使用明火会扰乱气流。一次性接种环使用后应置于消毒剂中，并按污染性废弃物处理。 八、培养皿、试管和试剂瓶 因为没有明确事故发生及显著溢出物，所以不能确定打开平板、试管及试剂瓶里部分微生物体是否会引发试验室感染。然而，这些很高传染因子中很有可能有部分传染病会发生。当打开存在真菌类平板、试管及瓶子时需格外小心，因为在操作中可能会释放出大量孢子。部分培养物应该在生物安全柜内进行操作。在吸收液体培养物前，为确保它成为均一悬液，应给振动混匀。猛烈摇动将产生大量气溶胶。轻微打旋能够成为均一悬液，但仍伴有微量气溶胶产生。当液体培养物恢复原状停留片刻后再打开容器时，气溶胶产生降低。将消毒后热金属接种环或针插入液体或斜面培养物会产生飞溅并产生气溶胶。为降低气溶胶产生，金属接种环应在空气中冷却，或在容器内壁，或在繁殖物培养琼脂表面没有物体生长地方接触一下进行冷却。用特定设计电或气体烧灼装置消毒接种环或针，比用开口火焰加热更可取。这种小型烧灼装置有一个筒，能够包容从接种环或针上飞溅出任何物质。通常可任意使用接种环是有用。加热使用过后为了能够立即消毒，丢弃首先放入消毒剂容器中。 在粗糙不平整培养基上用接种环或针划线接种培养物会造成气溶胶产生。假如培养基表面光滑整齐，通常是不会产生气溶胶。丢弃粗糙不平整培养基是好安全技术。 有盖培养皿内培养物脱出水里通常存在活细小微生物，而且在倒转平板盖子和边缘之间形成一层膜。当打开平板时这层膜破裂，释放出气溶胶。对于盖子和边缘只有三个接触点塑料有盖培养皿可能降低危害物。使用完全干燥平板也能降低这种风险，不过从厌氧罐内取出孵育平板（进行厌氧孵育）很轻易变湿。在盖子内装上过滤膜虽能降低危害物产生，但不能预防扩散。假如平板显著潮湿，则应在生物安全柜内打开。 打开有螺旋帽瓶子和带塞试管时会产生看不见气溶胶。这是因为在打开塞子或盖时，感染性液体在塞子边缘处形成那层膜被破坏，产生了气溶胶。振动或离心后立即取下长颈瓶、瓶子、离心管棉花塞子或塞盖，产生气溶胶造成环境污染。长颈瓶或离心管不处于垂直状态，去除湿瓶塞也会产生危害。另外，离心时会产生微量泡沫，瓶塞很可能会被少许弄湿。因为这些可能性，所以应在生物安全柜内打开液体感染性培养物及危害物质，同时穿戴手套、长袖试验室工作服，这是很好安全方法。干缩、有感染性培养物可聚集在盖子边缘或培养管/长颈瓶壁上，当受到干扰时会扩散到空气里。装有干粉状危害物容器应在生物安全柜内打开。 九、安瓿 打开装有冻干或液体培养物密封安瓿会产生气溶胶。为预防或降低气溶胶产生，应在生物安全柜内打开安瓿。在复苏安瓿内容物时，要小心仔细以防割破手套和手，预防碎玻