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玉米转录因子 ZmWRKY25的克隆及其抗逆功能分析 植物在生长的过程中， 常常受到各种不利环境的影响， 严重危害植物生长发 育及其产量和品质， 甚至会导致植物死亡。 植物对各种逆境胁迫的响应往往是多 途径、多基因协同作用，从不同层次、不同水平调控对逆境的响应。 其中，转录水平上的调控越来越受到人们的关注， 如今对转录因子的研究已 成为植物基因功能研究的一个重点。 WRKY基因家族是目前研究比较多、重要的 逆境相关转录因子之一。 WRKY转录因子不仅参与植物的生长发育、代谢调控，还参与植物对生物胁 迫和非生物胁迫的调控。本研究通过生物学信息学分析，在玉米自交系 B73cDNA 文库中分离鉴定出 ZmWRKY25基因，并对 ZmWRKY25基因在抗逆方面的功能进行了 较系统的研究，研究结果如下： 1 本研究以玉米自交系 B73cDNA文库为模板，根 据 GenBank中刊登的基因序列设计特异性引物，登录号为 NMsub0/su用 PCR方法克隆得到一个 WRKY基因。 对该基因序列应用生物信息学软件分析表明，该基因编码区全长 936bp，编 码 311 个氨基酸。预测编码蛋白的相对分子质量为 31.88kD, 等电点为 9.89 ，含 有跨膜区。 通过构建系统进化树进行同源性分析， 显示 ZmWRKY25与水稻中的 OsWRKY25 遗传距离较近。通过在线分析，预测该基因编码的蛋白含有信号肽及核输出信号， 亚细胞定位于细胞核。 2 成功构建了植物表达载体 pBI121∷ZmWRKY25，并通过农杆菌 EHA105介导 的方法转化到模式植物拟南芥中， 通过 50mg/L硫酸卡那霉素的筛选及 PCR鉴定， 获得了 T3 代转基因拟南芥植株。 3PEG6000模拟的干旱逆境可以快速地诱导玉米 ZmWRKY25基因的表达。 在拟南芥中过表达 ZmWRKY25基因，可能提高了其对干旱逆境的耐受性。 4 外源的 ABA可以快速地诱导玉米中 ZmWRKY25基因的表达。 ZmWRKY25基因可能参与 ABA介导的信号途径， 并且 ZmWRKY25可能是 ABA信 号途径中的正调控因子。综上所述，本研究对 WRKY转录因子家族的成员之一 ZmWRKY25进行了初步的研究， 为研究 WRKY转录因子参与的植物响应胁迫调控的 分子机制、植物逆境调控机理提供了一定的理论依据。 但是，对其调控的下游基因的表达并未做深入探索， 以及参与的信号途径并 未从分子水平进行研究， 因此，本实验还可以从这几个方面进行完善， 为植物的 抗逆分子机制研究及提高植物的抗逆性奠定基础。