临床上课致突变作用.pptVIP

2021/2/12 * 计数最低营养平皿上的回变菌落数来判定受试物是否有致突变性 标准试验菌株有四种:TA97和TA98检测移码突变, TA100检测硷基置换突变,TA102对醛、过氧化物及DNA交联剂较敏感。 2021/2/12 * 细菌回复突变试验(Ames试验) 鼠伤寒沙门氏菌原养型(his+) 组氨酸营养缺陷型突变株。(his-) 正向突变 回复突变 代谢活化系统 受试物 2021/2/12 * 阳性结果判定: ①平均每皿回变菌落数为对照(自发回变菌落数)的2倍及以上 ②可重复性,用一个相应菌株重复 (阴性全套菌株重复); ③有剂量－反应关系。 试验中注意设立阳性和阴性对照组。 2021/2/12 * 试验的优缺点: 检出率较高、重现性好、简便、快速、经济; 使用S9,具有与体内相似的代谢特点; 固体、液体、气体样品均可检测; 微生物遗传密码甚少;远不及哺乳动物; 受试物需命中限定数目的靶基因,才能显示致突变活性。 2021/2/12 * 微核试验(Micronucleus test,MNT) 经致突变物作用后,染色体无着丝点断片或因纺锤体受损伤而丢失的整个染色体在细胞分裂的后期仍留在子细胞的胞质内,成为一个或几个规则的次核,称为微核。 常用啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验,每个剂量组至少观察5000个细胞。 PCE是红细胞成熟的一个阶段,此时红细胞的主核已排出,微核容易辩认. 2021/2/12 * 微核试验是观察受试物能否产生微核的试验。 其主要可检出DNA断裂剂和非整倍体诱变剂。 2021/2/12 *  单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)又称彗星实验(comet assay),是近年发展起来的一种快速检测哺乳动物细胞DNA损伤的实验方法。 单细胞凝胶电泳实验（SCGE） 2021/2/12 * 细胞DNA不同损伤程度的彗星电泳图 根据“彗星”尾部占头部的大小百分比将细胞损伤分为： 0 - 无损伤 5% Ⅰ- 轻度损伤 5%-20% Ⅱ- 中度损伤 21%-40% Ⅲ- 重度损伤 41%-95% Ⅳ- 完全损伤 95% 2021/2/12 * 1. 原理 显性致死是指在发育中的生殖细胞（精子）在致突变物的作用下发生了染色体损伤,从而使受精卵在发育过程中死亡。由于发生在子 1 代,故称为显性致死。因此,可以利用这一原理来检测化学物质的致突变性。 该试验是间接观察生殖细胞染色体损伤的方法。 显性致死突变试验 2021/2/12 * 2. 方法 选择雄性成年动物(小鼠或大鼠),并接触受试物(6天或3个月);与雌性动物(每周交换一批)同笼交配6～8周,同笼第17～19天处死雌鼠并取出子宫进行检查(受孕情况,活胎数,早期死亡和晚期死亡胚胎数) 2021/2/12 * 2021/2/12 * 3. 结果分析 最主要的观察指标是早期胚胎死亡数,它可以反映化合物致突变作用的强弱。 受孕率(%)＝(受孕鼠/交配雌鼠数)×100 总着床数＝活胎数＋早期胚胎死亡数＋晚期胚胎死亡数 平均着床数＝总着床数/受孕雌鼠数 早期胚胎死亡率(%)＝(早期胚胎死亡数/总着床数)×100 晚期胚胎死亡率(%)＝(晚期胚胎死亡数/总着床数)×100 平均早期胚胎死亡数＝早期胚胎死亡数/受孕雌性动物数 2021/2/12 * 1. 原理:精子畸形是指精子形态和畸形精子数量的增多。精子畸形试验是利用精子形态检测法来检测化合物对生殖细胞的致突变作用。 2. 方法 3. 结果分析 精子畸形主要表现在头部 一般可分为:无钩,香蕉形,无定形,尾折叠,双尾等 现也有分为:头部,颈部,中断和尾部畸形 精子畸形试验 2021/2/12 * 2021/2/12 * 谢 谢 ! 2021/2/12 * Ppt宝藏_提供下载 2021/2/12 * 2021/2/12 * 1. 原理:在高pH值环境中,断裂的DNA分子由于带负电在电场中向阳极伸展,形似慧星尾。DNA受损越重,含断裂片段越多,在彗星尾中出现的DNA就越多,表现为尾长和尾部荧光强度增加;而未受损伤的细胞DNA在电泳中仍停留在原位形成固形荧光团。因此,通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度可定量测定DNA损伤程度。 2021/2/12 * 配色方案修改: 配色方案在【格式】--【幻灯片设计】--【配色方案】--【编辑配色方案】下调整。 LOGO的添加: Lo