各类神经元细胞的培养方法.docVIP

体外神经细胞的培养己成为神经生物学研究屮十分有用的技术手段。神经细胞培 养的主要优点是:（1）分散培养的神经细胞在体外生长成熟后，能保持结构和功能 上的某些特点，而H长期培养能形成髓鞘和建立突触联系,这就提供了体内牛长 过程在体外重现的机会。（2）能在较长时间内直接观察活细胞的生长、分化、形 态和功能变化，便于使用各种不同的技术方法如相差显微镜、荧光显微镜、电子 显微镜、激光共聚焦显微镜、同位素标记、原位杂交、免疫组化和电生理等手段 进行研究。（3）易于施行物理（如缺血、缺氧）、化学和生物因子（如神经营养 因子）等实验条件，观察条件变更对神经细胞的直接或间接作用。（4）使于从细胞 和分了水平探讨某些神经疾病的发病机制，药物或各种因索对胚胎或新牛动物神 经细胞在生长、发育和分化等各方面的影响。我们实验室从80年代始开展了 神经细胞的体外培养工作，取得了一些经验，现将培养细胞分类及方法简要介绍 如下： 鸡胚背根神经节组织块培养 鸡胚背根神经节组织块培养 主要用于神经生长因子（NGF）等神经营养因子的生物活性测定。在差倒置显 微镜下观察以神经突起的生长长度和密度为指标半定量评估NGF的活性。 1、材料和方法 （1）选正常受精的鸡蛋，置于37°C生化培养箱内孵化，每日翻动鸡蛋一次。 （2） 取孵化8-12d的鸡蛋，用70%酒精消毒蛋壳，从气室端敲开蛋壳，用消 毒银剥除气室部蛋壳。 （3）