基因工程考点分析与训练.docVIP

《基因工程》知识梳理及考点例析 基因工程考点主要涉及三个方面的内容即工具酶的发现和基因工程的诞生、基因工程的 原理和技术、基因工程的应用。复习时要注意这三部分的联系，形成“操作工具一操作步骤 f应用”的章节内纵向知识链接；同时要结合必修教材中有关知识，形成基因工程与新陈代 谢、遗传物质基础、遗传规律、变异等横向的知识链接，特别是联系DNA的结构和功能、 半保留复制、屮心法则、密码子等基础知识。通过纵横知识链接，构成系统的知识结构网络。 一、 基因工程的概念 基因工程是按照人们的意愿，把--种生物的个别基因复制出來，加以修饰改造，然后放 入到另一种生物的细胞内，进而改造生物的遗传性状。在这一概念中，要把握好以下关系： 基因工程是狭义的遗传工程。 基因工程是一种分子水平上的体外操作技术。 基因工程导致的变异为基因重组，目的基因在受体细胞内的活动依然符合中心法则, 其表达的产物是天然蛋白质。 利用基因T程进行育种具有定向性、目的性强、育种周期短和克服远缘杂交不亲和性 的特点。 例1：①基因治疗是基因工程在医学上的应用之一，即把健康的外源基因导入有基因缺 陷的细胞中，达到治疗疾病的目的；②格里菲思实验：加热杀死的S型肺炎双球菌+R型菌 落tR型菌落+S型菌落。从变异的角度分析，①②变异的来源分别为（ ） ①基因突变，②基因重组 B.①基因重组，②染色体变异 C.①基因重组，②基因突变 D.①基因重组，②基因重组 解析：格里菲思的肺炎双球菌转化其实质是灭活的S型菌屮的控制S型菌相关性状的 DNA （具有活性）分子进入到R型活菌内并进行表达，出现S型菌的性状，使R型菌转化 为S型菌，这一-过程与基因T程基本相同，因此与基因工程一样，其变异來源属基因重组。 答案：D 二、 基因工程的操作工具 二种工具酶 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因丁程操作中的二种工具酶，涉及二者的知识点 见下表： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 来源 多数来自原核生物 细菌或病毒 作用特点 ①主要切割外源DNA,而对自身的DNA不起作用，达到 保护自身的冃的：②只能识别双链DNA分子中特定的脱 氧核昔酸序列：③只能在特定的部位进行切割，切割位点 一般具有反向重复序列。 使两个DNA片段（常指具有相 同的黏性末端）通过磷酸二酯键 连接起来 作用结果 形成黏性末端或平末端 形成重组DNA 作用实质 使特定部位的两核昔酸之间的磷酸二酯键断开 恢复被限制晦切开了的两个核 昔酸之间的磷酸二酯键 同时还应注意：①限制性核酸内切酶和DNA连接酶均不是指一种酶，而是各指一系列 的酶。二者虽都是蛋白质构成的酶，但组成和性质各不相同；②对限制性核酸内切酚专一性 的理解有两层含义：一是能专一性地识别特定的脱氧核甘酸序列，二是能专一性地在特定的 切点进行切割；③DNA连接酶和DNA聚合酶都能形成磷酸二酯键，但DNA连接酶是在两 个DNA片段之间形成磷酸二酯键，DNA聚合酶是在单个核廿酸与DNA片段之间形成磷酸 二酯键。 例2:下面是5种限制性内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图（箭头表示剪切点、 切出的断面为黏性末端）。下列叙述正确的是 限制酶1:—— 1 GATC——； 限制酶2：—CATG I ——； 限制酶3：——C 1 CATCC——； 限制酶4：——CCGC 1 GG——； 限制酚5：——ICCAGG——。 限制酶2和4识别的序列都包含4个碱基对 限制酶3和5识别的序列都包含5个碱基对 限制酶1和2剪出的黏性末端相同 限制酶1和3剪出的黏性末端相同 ■ I |「GiGATCC ill11t/ \GATC解析:酶1和酶3切割DNA ■ I |「GiGATCC ill11t/ \ GATC CTAG答案：D CTAG 基因工程的载体 （1） 具备的条件：①对受体细胞无害，不影响受休细胞正常的生命活动。②具有标记基 因，如抗四环索基因等，以便于鉴定H的基因是否进入受体细胞。③能自我复制，通过复制 进行基因扩增，否则对能会使重纽DNA丢失。④具有一?至多个酶切位点，以便于目的基因 的插入。⑤载体DNA分子大小应适合，以方便操作。 （2） 质粒：质粒主要来自于细菌，是能自主复制的小型环状DNAo质粒与拟核内的大 型环状DNA相比，存在数日较多，基因少如抗性基因等的区别。由于质粒内基因数目少， 对受体细胞无害，能自主复制，具有抗性基因等可作为标记基因以及具有多个酶切位点等特 点，所以是基因工程常用的载体。 质粒与染色体DNA相比，厉者DNA为线状，因此，用限制性内切酶处理质粒，使之产 生一个切口，则质粒DNA的长度不变，只是从环状变为类似于线状。 例3:基因工程中所用载体，不能有以下哪项结构或性状（ ） A.限制酶识别位 B.抗生素抗性基因 C.自我复制并裂解受体菌 D.侵染或