基因克隆和转基因论文.docVIP

基因工程的利弊 王家骥20090551147 2009级 城市环境艺术设计 摘要：转基因克隆技术是最近发展起来的利用细胞核移植技术生产转基因动物的方法，它是以动物体细胞 为受体，将目的基因以DNA转染的方式导入能进行传代培养的动物体细胞，再以这些体细胞为核供体， 进行动物克隆。与传统转基因方法相比具有明显的优势。木文概述了传统转基因技术的缺陷、转基因克隆 技术的优越性、研究概况以及目前存在的问题等。 关键词：转基因动物 克隆 转基因克隆DNA转基因植物 食品 生物学 引言：基因是细胞内DNA分了上具有遗传效应的特定核廿酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分了片 段。基因控制蛋白质合成，是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根木原因，即所谓“ 种瓜得瓜，种豆得豆“，”一母生九子，九子各不同“。基因通过DNA复制及细胞分裂把遗传信息传递给下 一代，并通过控制蛋H质的合成使遗传信息得到表达。 正文：生物学家早在一百多年前就知道，生物的表征遗传白其亲代。生物细胞的细胞核，含有染色体，其 组成分为DNAo DNA含有四种碱基■■腺嚓吟(adenine),胸腺U密呢(thymine),胞嗜噪(cytosine)和 鸟嚓吟(gunnine)(它们分别简称A、T、C、G)。这些碱基在DNA屮看似杂乱无章，但它们的排列顺 序，正代表遗传讯息。每三个碱基代表一种胺基酸的密码。基因就是这些遗传密码的组合，亦即代表蛋白 质的胺基酸序列。每个基因含有启动控制区，以调控基因的表达。 基因T程技术(基因T稈是一项很精密的尖端生物技术。可以把某一生物的基因转殖送入另一种细胞 屮，甚至可把细菌、动植物的基因互换。当某一基因进入另一种细胞，就会改变这个细胞的某种功能。) 在医药及农业上应用广泛。这项尖端科技加上最近突破性的生殖科技，却引发人们极大的隐忧及争论。 1 ?基因克隆和转基因过程 1.1基因克隆 基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为：分、切、连、转、选。吩” 是指分离制备合格的待操作的DNA,包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA； “切“是指用序列特异 的限制性内切酶切开载体DNA,或者切出H的基因；“连”是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DNA连 接起来，形成重组的DNA分了；”转“是指通过特殊的方法将重纽的DNA分了送入宿主细胞屮进行复制和 扩增；“选呗U是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分了的个体。基因技术工程的两个最基木的特点是 分子水平上的操作和细胞水平上的表达，而分了水平上的操作即是体外重组的过稈，实际上是利用工具酶 对DNA分子进行“外科手术”。 1?1?1基因克隆技术 基因克隆技术包括了一系列技术，它大约建立于70年代初期。美国斯坦福大学的伯格(PBerg)等人 于1972年把一种猿猴病毒的DNA与九噬菌体DNA用同种限制性内切酶切割后，再用DNA连接酶把 这两种DNA分子连接起来，于是产生了一种新的重组DNA分子，从此产生了基因克隆技术。1973年， 科恩(S.Cohen)等人把一段外源DNA片段与质立DNA连接起来，构成了一个重组质粒，并将该重组质 粒转入大肠杆菌，第一次完整地建立起了基因克隆体系。 一般来说，基因克隆技术包括把来H不同生物的基因同有白主复制能力的载体DNA在体外人工连接, 构建成新的重组DNA,然后送入受体生物屮去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。因此 基因克隆技术又称为分了克隆、基因的无性繁殖、基因操作、重纽.DNA技术以及基因工程等。 采川重组DNA技术，将不同来源的DNA分了在体外进行特异切割，重新连接，组装成一个新的杂合 DNA分了。在此基础上，这个杂合分了能够在一定的宿主细胞屮进行扩增，形成大量的了代分了，此过 程叫基因克隆。 1.1.2克隆过程概述 DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接, 然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分了操作的过稈，因此DNA克隆又称分了克 隆，基因操作或重组DNA技术。DNA克隆涉及一系列的分子生物学技术，如目的DNA片段的获得、载 体的选择、各种丁具酶的选用、体外重组、导入宿主细胞技术和重组了筛选技术等等。 目的DNA片段的获得 DNA克隆的第一步是获得包含目的基因在内的一群DNA分子，这些DNA分了或来H于目的生物基 因组DNA或来H目的细胞mRNA逆转录合成的双链cDNA分了。由于基因组DNA较大，不利于克隆, 因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段，常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是 基因序列已知而且比较小就可用人丁化学育接合成。如果基因的两端部分序列已知，根据已知序列设计引 物，从基因组DNA或cDNA屮通过PCR技术可以获