分子生物学：蛋白质磷酸化.ppt

;蛋白质磷酸化与非磷酸化;根据是否有调节物来分又可分成两大类：? 信使依赖性蛋白质激酶（messenger-dependent protein kinase），包括胞内第二信使或调节因子依赖性蛋白激酶及激素（生长因子）依赖性激酶两个亚类；非信使依赖型蛋白激酶。 ;;蛋白激酶的催化作用： 调节酶磷酸化 (1)磷酸化酶激酶P—激活 (2)糖原合成酶P—失活 蛋白质磷酸化 (1)核中组蛋白磷酸化—加速核酸的复制，转录。 　 (2)核糖体蛋白质磷酸化—加速蛋白质合成通性。 　 (3)使膜蛋白磷酸化—加速物质的转运。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 (1). 在胞内介导胞外信号时具有专一应答特点。与信号传递有关的蛋白激酶类主要受控于 胞内信使，如cAMP，Ca2+，DG（二酰甘油，diacyl glycerol）等，这种共价修饰调节方式显然比变构调节较少受胞内代谢产物的影响。 (2).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化控制了细胞内已有的酶活性。与酶的重新合成及分解相比，该方式能对外界刺激做出更迅速的反应。(3).对外界信号具有级联放大作用；(4).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化保证了细胞对外界信号的持续反应。 被磷酸化的主要氨基酸残基：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。组氨酸和赖氨酸残基也可能被磷酸化。;;1、Ser/Thr蛋白激酶 蛋白磷酸化是蛋白激酶将磷酸基因转移到特定底物蛋白上的共价修饰过程，调控蛋白质的酶学活性或生物学功能，分为: ①cAMP依赖的PK ②Ca2+/磷脂依赖的PK ③ Ca2+/ （CaM）钙调蛋白依赖的PK ④cGMP依赖的PK ⑤近年发现新成员——DNA依赖的PK ⑴cAMP依赖的蛋白激酶（ cAMP dependent protein kinase.PKA） cAMP-依赖蛋白激酶是一种四聚蛋白酶，含有两个调控亚基和两个催化亚基。当cAMP-依赖蛋白激酶的调控亚基结合时，激酶解离成两个具有催化活性的蛋白激酶（由催化亚基形成）和一个二聚的调控亚基。  cAMP-依赖蛋白激酶被活化后，它解离出来的活性蛋白酶能够催化ATP分子与目标代谢酶分子的磷酸化反应。一般是代谢酶的Ser或Thr残基的羟基被ATP磷酸化，其结果是代谢酶被抑制或激活。cAMP即是通过上述机制实现对代谢酶活性的调控。 ;结构与功能 2个调节亚基（R）+2个催化亚基（C）→PKA全酶复合体（R2C2）（无cAMP时，无活性） cAMP与特异R亚基结合→构象变化→成为R亚基二聚体+2个有活性C亚基,各种哺乳动物细胞可不同水平表达3种C亚基亚型(CαCβCγ)和4种R亚基亚型(RⅠ α RⅠ β RⅡ α RⅡ β) →结合成全酶PKA Ⅰ型和 Ⅱ型. ;;;1、IP3作用：IP3与IP3受结合后，变构，钙通道打开，贮于内质网的Ca2+释放入细胞质内，使胞质Ca2+浓度升高，引起一系列效应。如:平滑肌收缩等.　 2、DAG作用：激活蛋白激酶C,将存在于靶蛋白质中得丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化， 改变靶蛋白质的活性。如:糖原合成酶磷酸化后，停止合成糖原。 3、DAG与IP3的协调作用　　　IP3－ →细胞质中Ca2 + ↑－→ 糖原合成酶活性↑　　　蛋白激酶C－ →使IP3 诱导增高糖原磷酸化酶活性的过程终止。　 4、DAG的激活机理 　　　DAG－→ 增加蛋白激酶C对Ca2 + +的亲合性－→　在Ca2 +生理水平上被活化。蛋白激酶C为 77kd , 催化区抑制调节区,当DAG结合到蛋白激酶C上，解除酶的调节区的抑制作用，使酶发挥催化活性。;;4）cGMP依赖的蛋白激酶 (cGMP dependent protein kinase,,GPK) 1963年从肾脏首次发现cGMP 5）DNA依赖的蛋白激酶( DNA dependent protein kinase,DNA-PK) 是一类存在于细胞核内，能被DNA激活的特异的Ser/Thr PK ，可引起多种核结合蛋白磷酸化;;;