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HPLC法测定脑力宝丸中远志皂苷元含量 Abstract：Objective To establish a method for determination of Presenegenin in Naolibao Pill by using high performance liquid chromatograph Methods The HPLC method was conducted on a C18 column （4.6 mm×250 mm， 5 μm） with methanol-0.05% H3PO4 solution（70： 30） as mobile phase. The flow rate was 1.0 ml·min-1 and detection wavelength was 210nm，column temperature was 35℃. Results The method is highly specific， the linear range of Presenegenin was 59.68-298.4 μg·ml-1 with an average recovery 100.07%，RSD=0.87%.Conclusion The method is simple， accurate with a good reproducibility and is reliable for quality control of Naolibao Pill. Keywords：HPLC; Naolibao Pill; Presenegenin 脑力宝丸由远志、地黄、五味子、菟丝子、地骨皮、茯苓、石菖蒲、川芎、维生素B1、维生素E组成，载于《部颁标准中药成方制剂第十四册》，为中西复方制剂，具有滋补肝肾、养心安神之功效，主要用于肝肾阴虚所致的健忘失眠、烦躁梦多、潮热盗汗、神疲体倦等证。远志为君药之一，具有宁心安神之功效。其主要活性成分——远志皂苷元，为远志总皂苷碱水解的产物。本实验以远志皂苷元为指标成分，建立脑力宝丸HPLC含量测定质量控制方法。 1.1 仪器 Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司）， 检测器G7115A 进样器G7129C;*****-ALC-210.4电子分析天平（上海梅特勒托利多仪器有限公司）。 1.2 试药 脑力宝丸，神威药业集团有限公司（批号：***-*****、***-*****、***-*****）;远志皂苷元对照品（中国食品药品检定研究院，批号：*****-*****，）;甲醇，色谱纯（Thermo Fisher）;其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 检测波长的选择 取远志皂苷元对照品溶液，在200～400 nm范围内扫描，结果在210 nm处有最大吸收，故选择210 nm作为检测波长。 2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱： ***** xAqua -C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）柱;流動相：甲醇-0.05% H3PO4（70：30）;检测波长：210 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温35 ℃，进样量10 μL;理论板数按远志皂苷元峰计算应不低于3500。 2.3 对照品溶液的制备 精密称取远志皂苷元对照品（经减压干燥）7.5 mg，至25 mL量瓶中，加流动相溶解，稀释至刻度，摇匀，得每1 mL含0.3 mg的对照品储备液。精密吸取对照品储备液4 mL于10 mL量瓶中，流动相将其稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 2.4 供试品溶液的制备 取脑力宝丸30丸，除掉包衣，研细，取约2.5 g，精密称定，加入50 mL甲醇，水浴加热回流30 min，滤过，甲醇洗涤滤渣3次，每次10 mL，合并滤液与洗液，减压蒸干，残渣加入10% 盐酸溶液50 mL，采用水浴加热回流1 h，放冷，滤过，滤渣用水洗涤至中性，连同滤纸置锥形瓶中，加入甲醇40 mL，超声处理30 min，滤过，滤液放置50 mL量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.5 专属性 制作缺少远志的阴性样品（取除远志外其余药材，按法定工艺进行制备），采用供试品溶液制备方法制备成阴性对照溶液，并进行含量测定，结果显示，远志阴性对照溶液在与远志皂苷元对照品相同保留时间处未见明显色谱峰，证明该方法专属性良好。如图1所示。 2.6 线性关系考察 精密吸取远志皂苷元对照品储备液各2、3、4、6、10 mL于10 mL量瓶中，加流动相稀释得浓度分别为59.68、89.52、119.36、179.04、298.40 μg·mL-1的对照品溶液，分别