酶催化反应动力学.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * 在较低的温度范围内，酶催化反应速率会随着温度的升高而加快，超过某一温度，即酶被加热到生理允许温度以上时，酶的反应速率反而随着温度的升高而下降。 这是由于温度升高，虽然可加速酶的催化反应速率，同时也加快了酶的热失活速率。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 有机磷 农药抑制 有机磷对人畜的毒性主要是对乙酰胆碱酯酶的抑制，引起乙酰胆碱蓄积，使胆碱能神经受到持续冲动，导致先兴奋后衰竭的一系列的毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统等症状；严重患者可因昏迷和呼吸衰竭而死亡 乙酰胆碱是胆碱能神经（如副交感神经、运动神经、交感神经节前纤维等）末梢释放的一种神经介质。当神经末梢受刺激引起兴奋时，释放乙酰胆碱，与胆碱能受体结合，发挥神经-肌肉的兴奋传递作用。随后，乙酰胆碱即被胆碱酯酶水解而失去作用。如果胆碱酯酶的作用被抑制，就会发生乙酰胆碱过剩而集聚现象，引起胆碱能神经过度兴奋、 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2021/3/14 * 由于这类抑制剂与酶活性部位以外的基团相结合,因此其结构与底物结构并无相似之处,而且不能用增加底物浓度的方法来解除这种抑制作用，故称非竞争性抑制。 这类抑制最典型的例子是亮氨酸是精氨酸酶的一种非竞争性抑制剂。还有某些重金属离子如Ag+、Cu2+、Hg2+、Pb2+等对酶的抑制作用也属于这一类。 2021/3/14 * ③反竞争性抑制作用 抑制剂仅与酶-底物复合物[ES]结合, 使酶失去催化活性。 E + S ES E + P + I ESI 2021/3/14 * 这种抑制作用在单底物反应中比较少见,而常见于多底物反应中。 目前已经证明,肼类化合物对胃蛋白酶的抑制作用、氰化物对芳香硫酸酯酶的抑制作用、L-苯丙氨酸和L-精氨酸等多种氨基酸对碱性磷酸酶的抑制作用都属于反竞争性抑制。 2021/3/14 * 可逆抑制作用动力学 对于可逆抑制剂与酶结合后产生的抑制作用,可以根据米氏学说基本原理加以推导,来定量说明可逆抑制剂对酶促反应速度的影响。 2021/3/14 * ① 竞争性抑制 在竞争性抑制中,底物(S)或抑制剂(I)与酶(E)的结合都是可逆的,因此存在着如下的化学平衡式: 2021/3/14 * 2021/3/14 * 斜率 斜率 2021/3/14 * Km 变大,Vmax不变 2021/3/14 * 在加入竞争性抑制剂后,Vmax不变,Km变大，Km’﹥Km，而且Km随抑制剂浓度[I]的增加而增加。 双倒数作图所得直线相交于纵轴，这是竞争性抑制作用的特点。 2021/3/14 * ②非竞争性抑制 在非竞争性抑制中,抑制剂(I)与酶(E)或酶-底物复合物(ES)以及底物(S)与酶-抑制剂复合物(EI)的结合都是可逆的,因此存在着如下的化学平衡式: 2021/3/14 * 2021/3/14 * 截距 2021/3/14 * Km不变,Vmax变小 2021/3/14 * 在加入非竞争性抑制剂后,Vmax变小, Vmax随[I]的增加而减小， Km值不变，而且Km’= Km 。 双倒数作图所得直线相交于横轴，这是非竞争性抑制作用的特点。 2021/3/14 * ③ 反竞争性抑制 反竞争性抑制的特点是,酶(E)必须先与底物(S)结合,然后才与抑制剂(I)结合，即抑制剂(I)与酶-底物复合物(ES)的结合是可逆的，因此存在着如下的化学平衡式: 2021/3/14 * 2021/3/14 * Km、Vmax都变小 2021/3/14 * 在加入反竞争性抑制剂后,Km及Vmax都变小,而且Km’﹤Km，Vmax’﹤Vmax，即表观Km及表观Vmax都随[I]的增加而减小。 双倒数作图为一组平行线，这是反竞争性抑制作用的特点。 2021/3/14 * 图3-7 反竞争性抑制曲线 2021/3/14 * 现将无抑制剂和有抑制剂等不同情况下的米氏方程和Vmax及Km的变化总结归纳在表中。 2021/3/14 * 2021/3/14 * 图3-3酶与底物或抑制剂结合的中间物 2021/3/14 * 6.3 可逆抑制作用和不可逆抑制作用的鉴别 鉴别可逆抑制作用和不可逆抑制作用: 用透析、超滤和凝胶过滤等物理方法能否除去抑制剂来判断 还可采用化学动力学的方法来区分。 在测定酶活力的系统中加入一定量的抑制剂,然后测定不同酶浓度条件下的酶促反应初速度,以酶促反应初速度对酶浓度作图。 2021/3/14 * 不加抑制剂时,以酶促反应初速度对酶浓度作图得到曲线1所示的一条