志贺氏菌检测.pptVIP

2021/3/14 * 三、血清学分型 挑取三糖铁琼脂上的培养物,做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查,如果由于K抗原的存在而不出现凝集,应将菌液煮沸后再检查;如果呈现凝集,则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株,可用鲍氏多价1、2、3分别检查,并进一步用1-15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集,可用痢疾志贺氏菌3-12型多价血清及各型因子血清检查。 2021/3/14 * 2021/3/14 * 血清 诊断血清:是应用已知的标准菌株,免疫家兔获得. 多价(混合)诊断血清:该血清含有两种(或型)以上细菌的相对应性抗体. 单价诊断血清:该血清仅含有一种(或型)细菌的对应性抗体. 因子诊断血清:含有多种抗原成分的细菌,免疫动物所获得的抗血清,应用与该细菌含有共同抗原成分的其他细菌进行凝集素吸收试验,将血清中共同的抗体吸收,余下的仅一种(或一部分)特异性抗体成分,称为因子血清. 2021/3/14 * 抗O诊断血清:用菌体抗原(O抗原)免疫动物,获得的抗血清称抗O诊断血清. 抗HO诊断血清:用有菌体抗原(O抗原)和鞭毛抗原(H抗原)的细菌免疫动物,获得的抗血清称抗HO诊断血清. 表面抗原诊断血清:应用含表面抗原,如Vi抗原K抗原等细菌,经过处理,免疫动物所获得的抗血清,称．如Vi诊断血清． 2021/3/14 * 四、进一步的生化试验 在做血清学分型的同时,应做进一步的生化试验,即: 葡萄糖铵 西蒙氏柠檬酸盐 赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶 pH7.2尿素 KCN生长 水杨苷和七叶苷的分解 除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外,志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。 2021/3/14 * 四、进一步的生化试验 必要时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验,应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株,即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集,仍不得判定为志贺氏菌属的培养物。 2021/3/14 * 四、进一步的生化试验 已判定为志贺氏菌属的培养物,应进一步做 5%乳糖发酵 甘露醇 棉子糖 甘油的发酵 靛基质试验 志贺氏菌属4个生化群的培养物,应符合该群的生化特性。但福氏6型的生化特性与A群或C群相似。 2021/3/14 * 表2 志贺氏菌属4个群的生化特征 * * * * 大肠杆菌在其上的特征 2021/3/14 * 福氏志贺菌在HE琼脂平板上的菌落特征蓝绿色大肠埃希菌红色较大 2021/3/14 * 二、志贺氏菌的生物学特性 5、志贺氏菌的抵抗力: 志贺氏菌属与沙门氏菌属及其他肠道杆菌相比,对理化因素抵抗力较低,对酸较敏感,必须使用含有缓冲剂的培养基。在外界环境中的生存力,以宋内氏最强,福氏菌次之,痢疾志贺氏菌最弱。一般在潮湿土壤中能存活34天,37℃水中存活20天,在粪便内（室温）存活11天。日光直接照射30分钟,56-60℃10分即被杀死,对高温和化学消毒剂很敏感,1%石炭酸中15-30分钟即被杀死,对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感,但易产生耐药性。 2021/3/14 * 二、志贺氏菌的生物学特性 6、志贺氏菌的变异性: S-R型变异:菌落可由光滑型变为粗糙型,同时常伴有生化反应、抗原构造和致病性的变异。在机体内,尤其在慢性患者和恢复期患者,志贺氏菌可发生变异而失去原来的生化和抗原特性,成为不典型菌株。但其中部分不典型菌株,可通过10%胆汁肉汤等返祖为典型菌株。故在慢性患者或带菌者粪便检查时,对这类菌株要特别注意,必须多次反复检查。因这对传染源的发现及控制有重要意义。 2021/3/14 * 二、志贺氏菌的生物学特性 耐药性变异:自从广泛使用抗菌素以来,志贺氏菌的耐药菌株 不断增加,给防治工作带来许多困难。国内部分地区报道（1972-1974）,志贺氏菌对四环素的耐药率达74%、氯霉素73.6-97%、链霉素84-98%、金霉素75-100%、磺胺类97-100%,可见国内对常用几种抗菌素的耐药率相当高。 2021/3/14 * 二、志贺氏菌的生物学特性 毒力变异与其他变异:1963年南斯拉夫Mel氏首先创用依赖链霉素的志贺氏菌株（依链Sd株）口服预防痢疾。Sd株是一株必须有链霉素存在下才能生长的菌株,其毒力减弱但仍保持免疫原性。美国以天然变异无毒株与大肠杆菌杂交而获得的MH株制成疫苗,其免疫效果和稳定性均较Sd株差。我国正大力利用变异方法通过动物和药物处理等寻找安全有效可供口服的痢疾杆菌活菌苗,并已取得初步成效。 2021/3/14 * 二、志贺氏菌