白花拟万代兰组培苗的增殖、生根与炼苗.docxVIP

白花拟万代兰 ( Vandopsis undulata )组培苗的增殖、 生根与炼苗 收稿日期： 2015-09-08 基金项目：福建省特色花卉品种创新与种苗设施繁育产业 (编号： 2014S1477-7)。 通信作者：吴沙沙，博士，讲师，从事园林植物资源与应用 研究。 E-mail ： shashawu1984126 。 白花拟万代兰 (Vandopsis undulata )为兰科( Orchidaceae ) 拟万代兰属典型的热带附生兰， 产中国云南南部至西北部 (勐海、 腾冲和怒江河谷)、西藏东南部(墨脱、背崩)，生于海拔1 800? 2 200 m 的林中树干上，尼泊尔、锡金、不丹和印度东北部也有 分布[1] 。在兰科植物中，拟万代兰属约 5 种，目前，均未实现 工厂化生产供应市场，野外资源急需保护和人工扩繁 [2] 。白花 拟万代兰花大素雅，具芳香，有很高的观赏价值，具有很大的市 场前景。拟万代兰属约有 5 种，中国仅有拟万代兰 ( V. gigantea ) 和白花拟万代兰 2 个种。兰科植物单个果实种子量大是其显著优 势，利用种子进行大规模繁殖是对保护兰科植物的重要手段 [3] 。 兰花种子又称种胚，其细如粉尘，只有在显微镜下才能看清，没 有胚乳，处于原胚阶段，缺乏营养 [4-5] ，多数兰科植物依靠其 自身营养则难于萌发， 因此外源营养对兰花种子的萌发显得尤其 重要 [6] 。传统的繁殖方式，繁殖系数低、速度慢 [7] ，不能满足 日益增长的市场需要。 找到一个快速繁殖种苗的方法对其种质资 源的保护和开发利用将具有重要的现实和理论意义。 本试验采用不同培养基配方、 栽培基质， 对白花拟万代兰增 殖、生根及组培苗移栽成活率进行了研究，探讨在无菌培养、移 栽过程中不同因素对其成活、 生长发育的影响， 以期获得最适宜 的无菌培养配方和移栽条件，为提高白花拟万代兰的繁殖系数， 获得大量优质组培苗提供一定的理论依据。 材料与方法 材料 2013年 9月，对购自云南腾冲的白花拟万代兰植株上未开 裂果荚内的种子进行无菌播种，所用培养基为： MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+8 g/L 琼脂 +30g/L 蔗糖 +2 g/L 活性炭。丛 生芽的增殖与生根培养材料来源于无菌播种 90 d 的无根种胚苗。 炼苗所用植物材料为生根培养 90 d 的组培苗。 试验方法 丛生芽的增殖与生根 以无菌播种90 d后，芽长为0.5?1.0 cm尚未生根的白花 拟万代兰小苗为材料，采用 L9（34） 正交试验研究不同基本培 养基、6-BA、IAA、椰子汁（新鲜椰子汁）对丛生芽增殖和生根 的影响（表1）［8］。每瓶接种7株（图1-A），每个处理30瓶， 3次重复。培养条件为：温度（25± 2） C,相对湿度70%?80% 光照度 1 000 ? 1 500 lx ，光照时间 12 h/d 。培养 30 d 后统计 增殖数、生根数、叶片数，测量根长，并对每个处理中随机选择 的10株植物进行生长状况评分，以 1?4分计：1表示植株长势 差， 增殖数 少，出现褐化； 2 表示长势整齐， 但增殖数少或植株欠健壮； 3 表示长势整齐，植株根系健壮，茎叶生长良好； 4 表示长势整 齐，植株健壮，新生芽多而饱满。根据统计分析结果，筛选适合 白花拟万代兰丛生芽增殖和生根的最适培养基。 炼苗移栽 将生根壮苗后的组培苗放置于人工气候箱中进行炼苗， 培养 条件为：温度（25土2） C,光照度1 000?1 500 lx，光照时 间 12 h/d 。选择大小适合的组培苗，将其在人工气候箱中闭瓶 培养 10 d ，开瓶培养 1 d 后[9] ，从培养瓶中取出幼苗，用清水 洗净培养基， 再用 1 000 倍 75%可湿性多菌灵溶液浸泡处理 12 h， 自来水冲洗后备用（图 1-B） 。以苔藓、泥炭土、珍珠岩、木屑 4种基质为 4 个因素，每因素 1、2、3 3 个体积比例作为 3个水 平，采用 L9（ 34）正交试验设计配置移栽基质研究其对白花拟 万代兰组培苗移栽成活率的影响。 移栽后置于温室中培养， 温室 环境条件为：温度（25±2） C,光照度1 000?1 500 lx，光 照时间 12 h/d ， 60 d 后统计白花拟万代兰组培苗移栽成活率。 数据处理方法 用 SPSS19.0 统计分析软件对数据进行方差分析和多重比较[10] ；采用以下公式进行原球茎的增殖系数、 生根率、平均根长、 平均叶片数的计算。 增殖系数 =增殖后芽数 / 接种外植体数 [11] ； 生根率=（生根植株总数/接种植株总数）x 100% 平 均根长 =所有植株总根长 /总根数； 平均叶片数 =植株叶片总数 / 总株数。 结果与分析 不同处理对丛生芽增殖的影响 丛