生物化学课件DNA复制与修复.pptVIP

2021/3/17 * 作用顺序 DNA复制酶系 四、DNA复制的过程 2021/3/17 * 大肠杆菌的DNA复制 复制的起始 ① DNA复制起始位点:大肠杆菌的复制起点由245bp构成,其中有3个13bp和4个9bp的关键序列 GATCTNTTNTTT 成串排列的三个13bp序列 共有序列 共有序列 TTATCCACA DnaA蛋白结合位点四个9bp序列 DnaA蛋白 （20-40） ATP结合位点 DnaB (解螺旋酶) SSB 大肠杆菌DNA复制起点起始阶段的结构模型 DNA DnaA 识别起始序列,解开双链 DnaB 解开DNA双链 DnaC 帮助DnaB结合于起点处 HU类组蛋白 使DNA弯曲,刺激复制的引发 SSB 结合单链DNA RNA 聚合酶 促进DnaA活性 Top II 消除解链过程产生的扭曲张力 2021/3/17 * ② 解旋解链,形成复制叉: 由拓扑异构酶和解链酶作用,使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开,碱基间氢键断裂,形成两条单链DNA。单链DNA结合蛋白（SSB）结合在两条单链DNA上,形成复制叉。 2021/3/17 * ③ 组装引发体:由蛋白因子（如dnaB等）识别复制起始点,并与其他蛋白因子以及引物酶一起组装形成引发体（解螺旋酶、引物和引物酶）。 ④ 引发:在引物酶（RNA聚合酶）的催化下,以DNA为模板,合成一段短的RNA片段,从而获得3端自由羟基（3-OH）。 2021/3/17 * 2. 复制的延长 DNA聚合酶,以3??5?方向的亲代DNA链为模板,从5??3?方向聚合子代DNA链。在原核生物中,参与DNA复制延长的是DNA聚合酶Ⅲ;而在真核生物中,是DNA聚合酶α（延长随从链）和δ（延长领头链）。 2021/3/17 * 引发体向前移动,解开新的局部双螺旋,形成新的复制叉,随从链重新合成RNA引物,继续进行链的延长。 2021/3/17 * oric 复制叉2 复制叉1 终止复制叉2 终止复制叉1 复制叉1 复制叉2 完成复制 DNA拓扑异构酶IV 连锁染色体 3. 复制的终止 复制的最后两个复制叉在终止区域相遇,这个区域有20个碱基对序列组成,叫Ter序列(terminus) 。Ter序列的功能是结合一种叫Tus的蛋白质。而Ter-Tus复合体能抑制前进的复制叉,使复制停止。DNA拓扑异构酶IV使复制的DNA 分开。 2021/3/17 * ① 去除引物,填补缺口: 原核生物,由DNA聚合酶Ⅰ来水解去除RNA引物,并由该酶催化延长引物缺口处的DNA,直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。而真核生物的RNA引物,由一种特殊的核酸酶来水解,冈崎片段仍由DNA聚合酶来延长。 2021/3/17 * ② 连接冈崎片段: 在DNA连接酶的催化下,形成最后一个磷酸酯键,将冈崎片段连接起来,形成完整的DNA长链。 2021/3/17 * 4. 真核生物端粒的形成: 端粒（telomere）:指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构部分,通常膨大成粒状。其共同的结构特征是由一些富含G、C的短重复序列构成,可重复数十次至数百次。人端粒DNA由5??3?方向的（TTAGGG）n 反复串联组成,长约5~15kb,是非结构基因,不具编码蛋白质的功能 。 2021/3/17 * 端粒酶（telomerase）: 端粒酶是一种RNA-蛋白质复合体,它以自身RNA为模板,通过逆转录过程对末端DNA链进行延长。 线性DNA在复制完成后,其末端由于引物RNA的水解而可能出现缩短。故需要在端粒酶的催化下,进行延长反应。 2021/3/17 * 五、DNA的损伤与修复 1、DNA的损伤（突变） DNA在复制过程和复制结束后都能引起DNA的损伤。自发的或环境的因素引起DNA一级结构的任何异常改变称为DNA的损伤,也称为突变（mutation） 常见的DNA的损伤包括碱基脱落、碱基修饰、交联,链的断裂和重组等。 原因:生物因素,物理因素,化学因素 来源:细胞内部,细胞外部 部位:DNA的碱基,糖,磷酸二酯键 2021/3/17 * （一）引起突变的因素: 1．自发因素: (1)自发脱碱基:由于N-糖苷键的自发断裂,引起嘌呤或嘧啶碱基的脱落。每日可达近万个核苷酸残基。 (2)自发脱氨基:胞嘧啶自发脱氨基可生成尿嘧啶（C?A）,腺嘌呤自发脱氨基可生成次黄嘌呤（A ?I）。每日可达几十到几百个核苷酸残基。 (3)复制错配:由于复制时碱基配对错误引起的损伤,发生频率较低。 2021/3/17 * 2．物理因素: 由紫外线、电离辐射、X射线等引起的DNA损伤。其中,X射