细菌遗传4课时.pptxVIP

第七章 细菌的遗传分析;一、细菌及其基因组 0.3课时 二、转化重组与作图 1.0课时 三、接合重组与作图 1.5课时 四、性导重组与作图 0.2课时 五、转导重组与作图 0.8课时 六、同源重组及其机理0.2课时;一、细菌及其基因组;1、双链环状； 2、无蛋白质包装； 3、成环短缩变粗。如E.coli 染色体1333μm，300μm成环为25μm，50环后为1.5μm。;1.合成功能突变体( anabolic functional mutants) met- thr- his- leu- pyr-(嘧啶) cyc-(胱氨酸) thi-(硫氨酸)等 2.分解功能突变体(catabolic functional mutants) lac- gal- aru- mal- xyl-(木糖) rha-(鼠李糖) pdx-(吡哆醇)等 3.抗性突变体(resistant mutants) azir strr tonr 4.克隆形态突变(form mutants) h+ h r+ r 5.基础代谢突变(metabolism mutants) 抑制无义突变 Su+ 温度敏感突变 ts;1.重组频率高 Hfr重组率达10-2 2.突变率高，突变体 突??频率10-4-10-7 3.易表达、检测 单倍、隐性突变易表达。基本和添加物培养基印迹法接种易鉴别。 4. 拟有性 细胞内有致育因子等寄生性复制因子,能导致拟有性结合，能引起细菌、病毒间遗传物质转移。;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;三、接合重组（conjugation recombination）;接合与转化的化学鉴别 A、B混合培养有wt，添加以下物质后无wt为转化 ①DNA内切酶破坏DNA片断； ②氯霉素抑制DNA聚合酶活性； ③二硝基苯抑制能量供应，无wt时为转化，反之则反。;三、接合重组;三、接合重组;3.致育因子（fertility factor）;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;5、大肠杆菌染色体呈环状;（一）性导因子（F`-factor）;1. 使F-变成F+：F `与F+能，Hfr不能； 2.转移基因率：F+进入F-快、转移基因率低， F`与Hfr进入F-快、转移基因率高 3.F`与Hfr能将细菌基因转入受体，形成 部分二倍体， F+不能。;（三）性导（sex duction）;（三）性导（sex duction）; 五、转导重组与作图（transduction recombinating and mapping）; ① DavisU形管分开双亲无野生型，不分开有野生型，说明是接合或性导重组。 ② DavisU形管分开双亲后有野生型，可能是转导或转化重组。添加硝基苯或DNA酶后无野生型产生说明是转化重组，反之为转导重组。 ③添加血清前有野生型、添加后无野生型为转导重组。;(三)普遍性转导 (general transduction);①可转导供体基因组内任一基因 ②转导频率低，多为3×10-5 沙门氏菌染色体约2-3千个基因，噬菌体头部能装20-30个基因，占1%；有转导能力的沙门氏菌约0.3%。 所以，基因普遍性转导频率= 3×10-5 。;1、三 因子共导试验（three factor cotransduction ）;3、基因定距离; 共导子与重组子频率成正比，共导子中频率最小的重组子频率也必定最小，用双交换型最少可确定中央基因。;3、用共导子频率定距离;（六）特殊性转导;六、细菌同源重组及其机理; RecBCD是大肠杆菌用来起始切割解旋的DNA同源重组蛋白质。有切割、解旋和ATP酶3个系列、3个重组次单位：RecB、RecC与RecD均为依赖A