发酵工程技术菌种保藏方法2.3.3菌种保藏方法.pptVIP

2. 工业发酵菌种的选育 2.3.3 菌种保藏方法 斜面保藏法 斜面保藏法 03 适用：细菌、放线菌、酵母菌 02 保存期：1~6个月 01 条件：4℃冰箱，相对湿度50%~70% 04 影响因素：培养基和培养条件 05 优点：简单、成本低，随时观察菌株性状 06 缺点：自发突变、染菌、菌种退化 沙土管保藏法 保存期：数年 适用：产孢子或形成孢芽的微生物 01 02 03 缺点：存活率低 矿物油浸没保藏法 1 2 3 矿物油浸没保藏法 原理 为了防止菌种培养基失水，并隔绝氧气，以降低微生物的代谢作用，在无菌条件下向培养成熟的菌种斜面注入一层灭过菌的矿物油，油层高出斜面1 cm，然后保存于冰箱中 适用 不能利用矿物油作为碳源的细菌、霉菌和酵母菌等微生物的保藏。 保藏期 1年左右 悬液保藏法 原理 保藏时间 适用 01 03 02 悬液保藏法 寡营养保藏，是将微生物混悬于不含养分的媒液中，如蒸馏水、生理盐水、0.25mol/L磷酸缓冲液(pH6. 5)等，加以保藏的方法。 1年左右 大部分的放线菌、酵母菌、霉菌以及肠道科细菌等 真空冷冻干燥保藏法 保护剂 保存期：4℃冰箱，保存5~10年 适用：广泛 缺点：繁琐，设备技术要求高 低温保藏法 1 2 3 4 请在此处 添加关键字 方法 使用密封性能好的螺旋口小管，装入1～2 mL的菌液，直接放人低温冰箱中保藏。一般以较高浓度的菌悬液进行保藏为宜，温度低时保藏效果好，如果低温冰箱发生温度变化，引起悬液融化就会影响保藏效果。 优点 在工业生产中，该法比真空冷冻干燥保藏法方便。 适用 大多数微生物可在-20℃以下的低温中保藏。 保藏期 约为1年，某些菌可长达10年。 真空冷冻干燥保藏法 保存期：-150℃~-169℃，保存15年 适用：最为广泛 优点：高效 缺点：购置设备、费用高 干燥-载体保藏法 1 2 3 干燥-载体保藏法 适用 适用于产孢子或芽孢的微生物保藏，一般细菌芽孢常用砂管保藏，霉菌的孢子多用麸皮管保藏。 保藏期 1~10年 方法 是将菌种接种于适当的载体上，如河砂、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等，以保藏菌种。