原核生物基因表达调控.pptVIP

2021/3/23 * trp前导区的碱基序列已经全部测定,其中4个分别以1、2、3和4表示的片段能以两种不同的方式进行碱基配对,有时以1-2和3-4配对,有时只以2-3方式互补配对。 4 1 2 3 Terminator haripin 4 1 2 3 2021/3/23 * 3）转录的弱化效应 （1）当培养基中色氨酸的浓度很低时,负载有色氨酸的tRNA也就少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区，这时的前导区结构是2-3配对，所以转录可继续进行。 ? 2021/3/23 * 3’ 5’ 5’ 3’ 4 1 2 3 RNA Pol. Ribosome Help, I need Tryptophan 2021/3/23 * （2）当培养基中色氨酸浓度较高时,核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子,在4区被转录之前就到达2区,使2-3区不能配对，3-4区自由配对形成发夹终止子结构，转录被终止，trp操纵子被关闭。 2021/3/23 * 3’ 5’ 5’ 3’ 4 1 2 3 Ribosome RNA Pol. 2021/3/23 * 4）弱化子的作用机制 弱化子对基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA的结构而起作用的。 起调节作用的是某种氨基酰-tRNA的浓度。 属于这种调节方式的有大肠杆菌中的色氨酸操纵子、苯丙氨酸操纵子、苏氨酸操纵子、异亮氨酸操纵子等等。 2021/3/23 * 四. 转录终止阶段的调控 1）抗终止作用 不同的终止子的作用也有强弱之分,有的终止子几乎能完全停止转录;有的则只是部分终止转录,一部分RNA聚合酶能越过这类终止序列继续沿DNA移动并转录。如果一串结构基因群中间有这种弱终止子的存在,则前后转录产物的量会有所不同，这也是终止子调节基因群中不同基因表达产物比例的一种方式。 有的蛋白因子能作用于终止序列或与ρ因子结合，减弱或取消终止子的作用，称为抗终止作用(antitermination)，这类引起抗终止作用蛋白因子就称为抗终止因子(antiterminator)。 抗终止作用最有代表性的例子见于λ噬菌体的时序控制。 2021/3/23 * 噬菌体生活史 溶菌途径 溶源途径 2021/3/23 * 2021/3/23 * PL 、 PR :左右向转录的启动子 PRM : CⅠ蛋白基因维持启动子,受CⅠ浓度调控 CⅠ蛋白:是PL、PR的主要阻遏物,并可自主调控PRM cro蛋白: PL 、 PR的阻遏蛋白,并可抑制PRM，抑制cⅠ表达 2021/3/23 * ???? λ噬菌体裂解生长与溶源化的建立取决于两种阻遏蛋白CⅠ和Cro的合成。当CⅠ蛋白的合成占优势时, PRM被激活,CⅠ蛋白继续起始合成,因而溶源化状态建立;相反Cro蛋白合成占优势，则PRM被抑制，没有CⅠ蛋白的合成，于是λ噬菌体在 Cro蛋白的控制下进入裂解生长。 CⅠ＞ Cro 溶源; CⅠ＜ Cro 溶菌 2021/3/23 * λ噬菌体进入细菌后,由于DNA上无调节蛋白。寄主RNA 聚合酶分别结合于PL和PR。 PR转录Cro蛋白。PL转录翻译产生抗终止蛋白N。 2021/3/23 * 在抗终止蛋白N的帮助下,转录翻译出CⅡ、CⅢ蛋白。 在CⅡ、CⅢ蛋白作用下,PRE（ PRE主管建立溶源,repressor for establishment of lysogeny,位于cro和cⅡ之间）的操纵子向左转录cⅠ基因，产生CⅠ蛋白。 CⅡ、CⅢ蛋白活化PRE 2021/3/23 * 溶菌途径 cro表达在先,cⅠ在后,且cⅠ的表达需CⅡ和CⅢ帮助。而CⅡ可被寄主蛋白酶（hfl编码）水解。因此,当hfl产物存在时cⅠ基因不表达。此时Cro含量远大于cⅠ。且占据OR3则使cⅠ不能转录，进入溶菌途径。因此，Cro是进入溶菌途径的关键蛋白。 溶源途径 hfl表达受一系列基因的调控，寄主细胞碳源和能源缺乏时，使hfl产物活性降低，同时，CⅢ抑制hfl产物活性。因此，CⅡ增加，从而导致CⅠ增加。 CⅠ可抑制cro的表达，使噬菌体进入溶源途径。 2021/3/23 * 2）弱化作用 弱化作用（attennuation）是Charles Yanofsky等在研究色氨酸操纵子的过程中发现的一种新的基因表达调控方式。 弱化作用是通过DNA中可导致转录过程过早终止的一段核苷酸序列而发挥调节作用的。其共同特点是某些外部因素控制着弱化子发夹结构的形成。 2021/3/23 * 五. 翻译水平的调控 1) mRNA二级结构对翻译起始的调控 SD