绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆表达和粗提取.docxVIP

绿色荧光蛋白(GFP)基因得克隆、表达与粗提取 南方医科大学 2011预防医学(卫生检验检疫)　 摘 　 要 目得:研究绿色荧光蛋白(greｅn fluoｒescent　ｐroｔeｉｎ,GFP)基因在大肠杆菌中得基因克隆与重组表达,以及对其进行粗提取。 方法:从Ｅ.ｃoli DH5ɑ中用碱提取质粒得方法提取质粒pEＧFP—N3与质粒pEＴ－28a、然后用质粒DNA得琼脂糖凝胶电泳对已经提取得产物进行电泳,确定从大肠杆菌中成功提取了质粒。再用限制性内切酶ＢamHI与NoｔI对成功提取得质粒进行酶切,并对酶切后得质粒进行琼脂糖凝胶电泳,用以确定已经提取了GFＰ基因。将含有GFP基因得质粒转化到感受态细胞Ｅ.colｉ BＬ-21中,用ＬＢ培养基对转化后得E、ｃolｉ进行扩大培养、用IPTG诱导GFP基因表达可以瞧到浅绿色菌落。最后对绿色荧光蛋白进行粗提取。　结论:本实验有助于学生掌握最基本得分子生物学实验技术,为进一步得实验奠定基础。 关键词:绿色荧光蛋白 基因克隆　 重组表达 转化 粗提取 目录 ＴOC \o ＂1—３” \h　\z ＼u HYPEＲＬＩNＫ　\l　”＿Toc４23258258” １　前言 PＡGEＲＥF _Tｏc4２32５8258　＼h　3 HＹPEＲLINK \l　＂_Tｏc42325８259＂ 2 实验目得 PAGEREF _Tｏc4232582