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实验十一 邻二氮菲分光光度法测微量铁 一、实 验 目 的 二、实 验 原 理 三、仪 器 与 试 剂 四、实 验 步 骤 五、数 据 记 录 与 处 理 六、注 意 事 项 七、思 考 题 一、实验目的 1.学会比色法测定中标准曲线的绘制。 2.了解分光光度计的性能、结构及使用方法。 二、实验原理 邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下：            在pH=1.5～9.5的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物。 反应方程式如下： 橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。 Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。 三、仪器和试剂 仪器: 721型分光光度计、比色管（50ml）等 试剂: 1）A液（母液0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入50.0mL 1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。 2） B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液25.00mL，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。 3）0.15%邻菲罗啉水溶液； 4）10%盐酸羟胺水溶液； 5）醋酸钠溶液（1mol/L） 6）HCl(6mol/L) 四、实验步骤 吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸管吸取铁盐标准溶液5.00mL于50mL比色管瓶中，依次加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿以试剂空白为参比，在510nm测定溶液的吸光度值。 2. 标准曲线绘制 分别移取铁的标准溶液(0.01g·L-1)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于6只50mL比色管中；依次分别加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL邻菲罗啉溶液；用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min；在其最大吸收波长(510nm)下，用1cm的比色皿测得各标准溶液的吸光度，以不含铁的试剂溶液作参比溶液； 3. 试样中铁的含量测定 吸取试液10.0mL于50mL比色管中，加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min。 仍以不含铁的试剂溶液作参比溶液，于分光光度计上测定吸光度。 五、数据记录与处理 C (×105) 1 2 3 4 5 A 0.321 0.582 0.896 1.222 1.501 绘制标准曲线 待测液含量计算公式： y=0.300x+0.002 W待测（g/ml）=x*0.01/10 六、注意事项 注意放置10min反应完全后立即测定 注意吸取溶液一定要规范操作。否则得到的标准曲线偏差大。 七、思考题 如果试样测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办?