园艺植物组织培养技术.pdfVIP

植物组织培养 农学函授专用 1 计划学时： 2 学时 属累计学时： 1-2 学时 教学目的：让学生了解组织培养的概念、类型及发展简史。 教学重点：组织培养、外植体、细胞学说、细胞全能性的概念，组培的条件，组织培养的类 型 教学难点：组织培养、外植体、细胞学说、细胞全能性的概念 教学方法：理论讲解 教学过程： [ A ] 组织教学 [ B ] 讲授新课 第一章 绪 论 第一节 植物组织培养的基本概念 植物组织培养是本世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的一项技术。本书所指植 物组织培养具有广泛的含义。即应用无菌操作方法，培养植物的一个离体器官、组织或细胞。 经各国科学家 80 多年的辛勤探索，现在可以说几乎所有的植物，其器官、组织或细胞都能离 体培养成功。大多数还能从细胞的一部分，甚至没有细胞壁的裸露的原生质体中，再生出无 数的小植株。这项技术已非常成熟，并取得了巨大的经济效益，在生物学理论探讨和生产实 践上已经取得了卓越的成就。 植物组织培养是生物技术的一个工作平台，近几年来由于转基因技术取得巨大成功，边 境证基因植物的组织培养上了一个新的台阶。 一、植物组织培养的概念 指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细 胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。 进行组培的条件： 1、无菌：指培养基、接种工具、外植体、接种环境等处于无真菌、细菌、病毒等微生 物的环境。措施：利用超净工作台接种（原理是空气过滤） 、用高压蒸汽灭菌处理培养基和接 种器械、用消毒灭菌剂浸泡外植体、用消毒液喷雾和紫外线照射接种室和培养室等。 2、人工控制的环境：指对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工控制。 3、培养基；由水、无机盐类、有机营养成分、激素、天然物质、 PH、琼脂等构成。需 2 经过高压灭菌才能使用。 4、外植体：用于离体培养的植物材料，包括植物器官、组织、细胞及原生质体等。 二、植物组织培养的类型 根据外植体的不同，分为： 1、组织培养：常用分生组织、形成层组织、薄壁组织、韧皮部组织等。 2、器官培养：常用根、茎、叶、花、果实、种子等。 3、胚胎培养：常用幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房等。 4、细胞培养；用单个或较小有细胞团培养，常用性细胞、叶肉细胞、根尖细胞等。 5、原生质体培养：就是用特殊方法脱去植物细胞壁，对裸露的有生活力的原生质团进 行离体培养。植物原生质体培养和细胞融合是植物细胞工程的核心技术。它克服了植物远缘 杂交的不亲和性，是品种改良和创造育种亲本资源的途径。 第二节 植物组织培养的发展简史 用插条的方式繁殖蔷薇花，以及切开马铃薯的块茎进行种植的方法，早在人们把它作为 学问研究之前就实际用于花卉及部分栽培作物的营养繁殖了。而在十九世纪开始，细胞学说 的开创与发展，对植物激素的研究和深入，微生物培养法等各个领域的知识的汇集才导致了 今日植物组织培养的发展。植物组织培养是本世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的 一项技术，经历了探索和开创、奠基、蓬勃发展三个时期。 一. 探索和开创时期 （1）细胞学说的提出： 1838～1839 年 Schwann和 Schleiden 创立了细胞学说， 他们认为 植物和动物都是由细胞构成的，细胞是有生命的有机体，细胞进行分裂而增多，并组建成生 物体。 （2 ）细胞全能性建立：在此理论的推动下， 1898 年德国植物学家 G．Haberlandt 设计 用实验方法来检验细胞学说， 于 1902 年发表了植物细胞培养的第一篇论文， 认为可以培养植 物的体细胞成为人工胚。他提出植物细胞具有全能性（