薄层色谱法教案.pptVIP

2021/3/26 * 不同条件下检视可以避免一些假阳性结果产生 可见光 365nm 展开剂:氯仿-甲醇-水 30:10:1 固定相:硅胶G预制板 显色剂:2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液 样品:制剂及柴胡对照药材 2021/3/26 * 2021/3/26 * 2021/3/26 * 2021/3/26 * 2021/3/26 * 制备薄层色谱 旋转薄层 加压薄层 2021/3/26 * 薄层原位水解 用于苷类成分的水解, 鉴定糖的种类, 可 进行单相或双相展开,辅助苷类成分的结构鉴定。 2021/3/26 * 常用展开剂 1、对展开剂的要求 ⑴ 对被测组分有良好的溶解性 ⑵ 有良好的分离效果 ⑶ 斑点圆整不拖尾 ⑷ 被测组分Rf值最好在0.3-0.5,组分较多,最好在0.25-0.75 ⑸ 展开剂不能和被测组分发生反应 ⑹ 沸点适中,粘度较小 2021/3/26 * 石油醚-乙酸乙酯系统 正己烷-乙酸乙酯-甲醇(6.4:3.6:0.5), 氨蒸气饱和 乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 氯仿-甲醇系统 氯仿-甲醇-水 (65:35:10)下层 氯仿-甲醇-水 (2.5:1:0.5) 氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水 (15:40:22:10) 正丁醇-冰醋酸-水 (4:1:5) 2021/3/26 * 薄层板及其处理 薄层板表面应均匀、平整、光滑,无麻点、无气泡、无破损及污染。 薄层板放置过久被杂质污染,可用氯仿、甲醇或二者的混合溶剂展开预洗。 改性薄层板可在自制薄层板时加入改性剂,或用改性剂浸渍薄层板制备。 薄层板使用前可于110℃下活化30分钟,置干燥器或密闭容器中保存备用。预洗后的薄层板也应重新活化。 2021/3/26 * Camag Linomat-5半自动点样仪操作 2021/3/26 * Linomat 5 半自动点样仪 点样方式 喷雾点样 可使用的点样针体积 100,500ul 可使用的薄层板大小 10×10,10×20,20×10,20×20cm 软件 WinCats薄层色谱工作站（Windows 2000） 2021/3/26 * Linomat 5 操作前的准备 气源 仪器使用氮气或空气,所需气体压力应为4-6bar（58-87psi）,工作时气流量约为1L/min。 调节点样塔 将点样塔下的按钮压住,可左右调节点样塔位置,相应改变样品点距薄层板底边的位置。 放置吸附废液薄层板 在点样塔下应放置一块废弃的薄层板,以吸附点样针排出的废液。 装载样品薄层板 2021/3/26 * Linomat 5 操作前的准备 2021/3/26 * Linomat 5 操作前的准备 2021/3/26 * Linomat 5 操作 采用WinCats 工作站可灵活地控制半自动点样仪 2021/3/26 * Linomat 5 操作注意事项 样品溶液应澄清,防止溶液中的沉淀堵塞点样针。 点样针针头距薄层板很近,在薄层板台上放置薄层板时应特别注意薄层板是否正确安放,防止薄层板碰撞损伤针头,影响点样效果。点样时如发现针在薄层板上形成划痕,应立即停止点样,检查仪器。 定期检查喷头是否污染和堵塞,需清洗时可卸下喷头,用超声波清洗,清洗及装卸时注意保护喷头不受损伤。重新安装喷头时一定要注意保证点样针可顺利穿过,防止损伤点样针。 在仪器上不要放置杂物,以免阻碍薄层板台移动 2021/3/26 * Camag Scanner 3薄层扫描仪操作 2021/3/26 * Camag Scanner 3薄层扫描仪 光源 配有钨灯、氘灯和汞灯三种光源。 扫描范围 190-800nm。 单色器 光栅 扫描方式 线性扫描 软件 WinCats薄层色谱工作站（Windows 2000） 2021/3/26 * Camag Scanner 3薄层扫描仪 薄层板的放置 将薄层板底边向前,面朝上,靠右放于薄层板台上。薄层板的右下角对准薄层板台原点（x、y 刻度均为0的位置）。用磁条固定。 0 刻度 20 20 刻度 扫描仪 薄层板放置位置示意图 2021/3/26 * Scanner 3 操作 采用WinCats 工作站可灵活地控制扫描仪 2021/3/26 * 仪器性能检定—CAMAG Scanner3仪器自检方法 在WinCats菜单中选择Scanner3-Qualification-Start… 进入仪器自检菜单。 2021/3/26 * 仪器性能检定—CAMAG Scanner3仪器自检方法 按图中表示方向装载好自检薄膜,注意四角及各边中点均与薄层板台上的刻度对准